[发明专利]一种鸭肝炎二价活疫苗及其制备方法

说明书

本发明涉及一种鸭肝炎二价活疫苗及其制备方法。本发明具有：1)本发明的疫苗株DHV‑1 QL1株通过尿囊腔接种SPF鸡胚培养，DHV‑3 QL3株通过绒毛尿囊膜或卵黄囊接种SPF鸡胚培养，制备的疫苗抗原含量高，均≥10^8.5ELD₅₀/ml，具有安全性好、免疫原性优良等特点，且突破了DHV‑3型毒株只能在鸭胚增殖的局限；2)用SPF鸡胚培养的病毒液降低了外源致病微生物污染的风险，提高了劳动效率，降低了生产成本，更适合大规模生产；3)本发明的二价活疫苗可以同时预防DHV‑1型和DHV‑3型强毒对雏鸭的攻击；4)本发明的生产工艺简单，易于质量控制，批间差异性小，为生产安全合格的疫苗提供了保障。

技术领域

本发明涉及一种鸭肝炎二价活疫苗及其制备方法。属于兽用生物制品领域。

背景技术

鸭肝炎(Duck Hepatitis，DH)是由鸭肝炎病毒(Duck Hepatitis virus，DHV)引起雏鸭的一种以肝脏呈现出血性炎症为特征，具有急性、高度接触性和致死性的传染性疾病。该病一年四季均可发生，自然暴发时仅发生于雏鸭，对养殖业造成了巨大经济损失。传统的鸭肝炎病毒有三个血清型，分别引起1型、2型和3型鸭肝炎(陆承平.兽医微生物学(第三版)[M].北京:中国农业出版社,2001,564)。近年来，由于免疫压力等因素，血清Ⅰ型鸭肝炎病毒呈现出新的流行态势。中国台湾地区和韩国的学者陆续分离出了与1型DHV基因组结构相近的典型小RNA病毒，称台湾新型和韩国新型,均不与DHV-1产生交叉中和反应,为避免混淆,已将鸭肝炎病毒改称为鸭甲肝病毒(DHAV)，分为血清I型(DHAV-1)、台湾新型(DHAV-2)和韩国新型(DHAV-3)。传统的DHV血清2型和3型分别归类为鸭星状病毒DAstV-1型和DAstV-2型。

在我国，鸭肝炎的流行大致分三个阶段：1958-1962年发生了DHAV-1型鸭肝炎的初次流行(黄均建.小鸭肝炎研究[M].上海:上海农业科学院畜牧兽医研究所.1963)；20世纪80年代初期起本病在我国再次流行，郭玉璞根据病毒中和实验和血清被动保护试验结果，证实我国流行的DHAV病原为1型鸭肝炎病毒(郭玉璞.北京鸭肝炎血清型的初步鉴定[A].中国畜牧兽医学会禽病研究会第三次学术讨论会论文摘要[C].1986,78)。其后，各地疫情此起彼伏，疫情能够被标准鸭肝炎I型弱毒疫苗的免疫所控制；1997年以来在某些地区出现较严重的流行，其疫情不能被标准鸭肝炎1型弱毒疫苗免疫完全的控制，3型鸭肝炎病毒在我国大陆首次被报道(林世棠,黄瑜,等.一种新的鸭传染病研究Ⅰ,流行情况与初步诊断[J].中国畜禽传染病,1996,4:14-17.舒敬良,黄瑜,等.新型鸭肝炎病毒的分离及初步鉴定[J].中国兽医科技,2002,32(1):15-16)。到目前为止，我国已有二十多个省市报道有本病发生，其中DHAV-3发病数量逐渐增多，使用现有的鸭肝炎疫苗和其高免血清以及高免卵黄抗体均未能防治该病。

我国目前肉鸭养殖规模已经超过35亿只，占到全球总量的70％以上，无论是存栏量还是鸭肉产量均稳居世界第一。在现代化、集约化和规模化的现代养殖业中，动物的疫病防治成为发展养殖业的关键。在众多动物传染性疾病中，防治好危害3周龄以下雏鸭，病死率达50％～90％的鸭肝炎对养鸭场具有重大的经济意义。

目前国内市场上用于预防鸭肝炎的活苗仅有鸭肝炎病毒血清1型单价苗。而3型鸭肝炎病毒的流行也很普遍，且已经出现了1型和3型鸭肝炎病毒的共感染。研制鸭肝炎二价活疫苗迫在眉睫。