[发明专利]一种检测畜产品中盐霉素和莫能菌素的方法

说明书

技术领域

本发明属于兽药残留检测技术领域，具体涉及一种利用高效液相色谱串联三重四级杆质谱联用仪，检测畜产品中盐霉素和莫能菌素的方法。

背景技术

随着人民生活水平不断提高，人们对畜类产品的需求量日益增加，兽药残留作为影响动物性产品食用安全的重要因素，已成为人们普遍关注的一个社会热点话题，兽药残留分析既需要精细的微量操作手段又需要灵敏的痕量检测技术。

盐霉素与莫能菌素同为聚醚类抗生素，具有抗菌和抗球虫的作用，同时也能促进动物生长发育和提高饲料转化率。虽然盐霉素与莫能菌素的推荐剂量使用是安全的，但是在实际生产中，由于使用剂量过大而导致的中毒事件时有发生。

目前，动物组织中盐霉素和莫能菌素的检测多为LC-MS检测方法，但对于高效液相色谱串联三重四级杆质谱来检测盐霉素与莫能菌素的报道少见，因此，建立一种一次性同步检测畜类产品中盐霉素和莫能菌素的方法，实现检出限更低、检测准确性更高、检测效率更高非常必要。

发明内容

本发明的目的在于克服现有检测技术的不足，提供一种检出限更低、检测准确性更高的畜类产品中盐霉素和莫能菌素的方法。

一种检测畜产品中盐霉素和莫能菌素的方法，其特征在于利用高效液相色谱串联三重四级杆质谱联用仪一次性同步检测畜类产品中盐霉素和莫能菌素，包括如下步骤：

⑴提取：称取2.00-2.50g样品，置于离心管中，加入10-12mL乙腈混匀，再加入3.00-3.20g无水硫酸钠，震荡混匀，超声提取10-12min；

离心取上清液于50mL离心管中，残渣加入5-6mL乙腈重复提取，合并两次上清液，定容至20mL，加入5mL乙腈和5mL正己烷，震荡离心，待净化。

⑵净化：取下层（乙腈层）5mL于圆底烧瓶中，旋转蒸发至1mL，氮气吹干；

普通肉类基质：圆底烧瓶中加入1mL乙腈超声溶解；

内脏类基质：圆底烧瓶中加入3mL甲醇+水（1：1）超声溶解，过WatersHLB柱（watersoasisHLB6cc/200mg依次用5mL甲醇5mL水活化），用5mL水淋洗，5mL甲醇洗脱于100mL圆底烧瓶中，40℃减压蒸干，加入1mL乙腈超声溶解。

⑶检测：采用高效液相色谱-质谱对样本进行检测，检测条件如下：

质谱参数：离子源ESI源；雾化气流量3L/min；热气流10L/min；界面温度300℃；脱溶剂管温度250℃；加热模块温度400℃；干燥气流量10L/min。

液相色谱参数：流动相组成：A:0.1%甲酸B:乙腈；流速：0.35Ml/min；A-10%B-90%恒流分析；进样量：2uL；色谱柱型号：ODS-III1.6μm。

本发明的效果：

较于传统与国家标准方法使用的液相色谱为检测仪器，本发方法使用液相色谱串联三重四级杆质谱联用仪，检出限更低，检测准确性更高，相关检出限达到盐霉素2μg/kg，莫能菌素10μg/kg。对于普通的肉类基质，可以简单地提取浓缩液专员上级分析，肝脏等样品使用HLB净化柱前处理，相对比较简便。同时，将盐霉素与莫能菌素合并检测，达到同时前处理并进行仪器分析，效率更高效。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明的技术方案做详细阐述，但不限定本发明的保护范围，相关领域的一般技术人员对本发明做的任何改动，只要不脱离本发明的实质，都将等价落在本发明权利要求书所限定的范围内。

实施例1

一种检测牛肉中盐霉素和莫能菌素的方法，包括一下步骤：

提取：称取待检测牛肉2.00g，加入10ml乙腈混匀，加入3.00g无水硫酸钠，震荡混匀。超声提取10min，离心取上清液于50ml离心管中；残渣加入5ml乙腈重复提取，合并两次上清液，定容至20mL，加入5mL乙腈和5mL正己烷，震荡离心，待净化。

净化：

取下层（乙腈层）5mL于圆底烧瓶中，旋转蒸发至1mL，氮气吹干。

检测：

采用高效液相色谱-质谱对样本进行检测，检测条件如下：

质谱参数：离子源ESI源；雾化气流量3L/min；热气流10L/min；界面温度300℃；脱溶剂管温度250℃；加热模块温度400℃；干燥气流量10L/min。

液相色谱参数：流动相组成：A:0.1%甲酸B:乙腈；流速：0.35Ml/min；A-10%B-90%恒流分析；进样量：2uL；色谱柱型号：ODS-III1.6μm。

仪器线性分析：