[发明专利]含检测GFOD2的骨质疏松血液诊断试剂及其应用

说明书

本发明涉及含检测GFOD2的骨质疏松血液诊断试剂及其应用。发明人对9例骨质疏松患者外周血样本及6例健康人对照外周血样本进行高通量测序，结合生物信息学方法进行基因筛选，挑选出候选基因GFOD2，分子验证结果证实GFOD2基因在骨质疏松患者外周血中低表达。本发明提示检测外周血中致病靶点基因将辅助临床骨质疏松的诊疗，为骨质疏松诊断、治疗及预测提供了新的解决方案。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及含检测GFOD2的骨质疏松血液诊断试剂及其应用。

背景技术

骨质疏松症(Osteoporosis)是由各种原因导致的骨量减少，骨组织微结构破坏，骨骼脆性增加，易于发生脆性骨折的一种全身性骨病。美国国立卫生研究院把骨质疏松症定义为“以骨强度下降而易于骨折为特征的骨骼系统疾病。其主要病理表现为松质骨骨小梁变细、断裂和数量减少，皮质骨多孔、骨质结构紊乱。依据发病的原因不同，骨质疏松可分为:原发骨质疏松和继发骨质疏松两类。原发性骨质疏松，临床上比较多见，主要分为3种：妇女绝经后骨质疏松症、老年性骨质疏松症和特发性骨质疏松症。继发性骨质疏松症主要由于以下因素引起：内分泌因素、过多使用激素类药物、营养因素、机体疾病因素以及其他因素。骨质疏松症本质上是一种骨重建障碍的疾病，导致的骨量减少(骨密度降低)、骨质结构改变和骨转换失衡构成了骨质疏松症的病理基础。研究骨质疏松病理的分子机制，探究异常表达的特异性基因与疾病之间的关系，有助于深入了解疾病的发病机制，有利于骨质疏松的早期诊断及预后。

为解决目前骨质疏松分子标记稀缺的问题，发明人对9例骨质疏松患者外周血样本及6例健康人对照外周血样本进行高通量测序，结合生物信息学方法进行基因筛选，挑选出候选基因GFOD2。进一步，本发明进行了分子生物学方法证实了GFOD2与骨质疏松病的关系：GFOD2在骨质疏松患者外周血中低表达，与骨质疏松病具有很好的相关性。血清检测有创伤小、方法简便、结果可靠等优点，检测外周血中GFOD2为骨质疏松诊断、治疗及预测提供了新的解决方案。本发明提供的候选基因GFOD2可用于制备骨质疏松辅助诊疗制剂，有望成为骨质疏松临床治疗的潜在基因治疗靶点，具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于提供GFOD2基因和/其表达产物在制备骨质疏松诊断和/或治疗制剂中的应用。

本发明的目的在于提供检测GFOD2基因和/其表达产物在制备骨质疏松诊断制剂中的应用。

进一步，骨质疏松诊断制剂检测外周血中GFOD2基因和/或其表达蛋白的表达情况。

为实现上述目的，本发明首先通过高通量测序结合生物信息学方法筛选到候选基因GFOD2，进一步通过分子生物学方法验证了GFOD2与骨质疏松的关系：GFOD2在骨质疏松患者外周血中低表达，与骨质疏松病具有很好的相关性，可用于制备治疗骨质疏松制剂和/或骨质疏松诊断制剂，具有重要的临床应用价值。

本发明的目的在于提供GFOD2基因在制备骨质疏松诊断制剂中的应用。

进一步，所述的骨质疏松的诊断制剂包括用荧光定量PCR方法、基因芯片方法检测骨质疏松外周血中GFOD2基因的表达。

荧光定量PCR法是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板的初始浓度。荧光定量PCR的出现，极大地简化了定量检测的过程，而且真正实现了绝对定量。多种检测系统的出现，使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率，反应快速、重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。