[发明专利]一种白色念珠菌特异性检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及微生物检测领域，具体涉及一种白色念珠菌特异性检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

念珠菌属于真菌界——半知菌亚门——芽孢菌纲——隐球酵母目——隐球酵母科，是双相型单细胞酵母菌。念珠菌是一种芽生的酵母状真菌，一种典型的条件致病菌。已知可以致病的常见念珠菌有：白念(Candidaalbican)、热带(Candidatropicalis)、近平滑(Candida，parapsilosis)、克鲁斯(Candidakrusei)、星状(Candidastellatoidea)、李也蒙(Candidaguilliermondii)和光滑念珠菌(Candida，glabrata)等八种在人体中，无症状时常表现为酵母细胞型；侵犯组织和出现症状时常表现菌丝型。

念珠菌是一种腐物寄生菌，广泛存在于自然界。是人体正常菌群之一，平时主要生存于人体的口腔、皮肤、粘膜、消化道、阴道及其他脏器中。正常人群白色的带菌率可高达40％；从阴道粘膜分离出来的念珠菌85％～90％为白色，而白色念珠菌(Candidaalbican)的致病性最强。

白念珠菌，又称白假丝酵母菌，常存在于人体口腔、咽喉、肠道、阴道粘膜等处，是重要的条件致病菌，在免疫功能明显下降(如器官移植、糖尿病、恶性肿瘤、血液病、严重营养不良等)，或大量使用抗菌素导致菌群失调时，该菌可引起严重的全身侵袭性感染。白念珠菌侵袭性感染的实验室诊断难度比较大，由于该菌是条件致病菌，在人体多部位栖息，经常引起浅表感染，临床分离阳性时不易判断是否致病：另外，许多深部标本无法采集，不能用培养法分离，这些都降低了诊断率。白色念珠菌(简称白念，Candidaalbicans，CA)、热带假丝酵母菌(简称热带，Candidatropicalis，CT)和光滑假丝酵母菌(简称光滑，Candidaglabrata，CG)是其中的主要致病菌，其分布广泛，感染类型多祥，已成为临床抗感染治疗的难点。

口腔念珠菌病是真菌一念珠菌属感染所引起的口腔黏膜疾病。近年来，由于抗生素和免疫抑制剂在临床上的广泛应用，发生菌群失调或免疫力降低，而使内脏、皮肤、黏膜被真菌感染者日益增多，口腔黏膜念珠菌病的发生率也相应增高。据报道，此种菌属于隐球菌科的念珠菌、高里念珠菌、假热带念珠菌，其中白色念珠菌是最主要的病原菌。

口腔念珠菌病按其主要病变部位可分为：念珠菌口炎、念珠菌唇炎、念珠菌口角炎、慢性黏膜皮肤念珠菌病。和白念珠菌感染有关的口腔疾病还有：扁平苔藓、毛舌和正中菱形舌炎。口腔念珠菌病如不加处理，可蔓延到咽喉、消化道及呼吸道，并可并发真菌性败血症、心内膜炎、脑膜炎等严重并发症。

口腔念珠菌病以局部治疗为主，但严重病例及慢性念珠菌感染常需辅以全身治疗才能奏效。目前，在治疗中以抗真菌西药药物为主，但大多为抗生素类药物，由于广谱抗生素本身可造成菌群失调(如口服四环素20天以上可有2％～3％的患者发生菌群失调)破坏人体消化道内细菌和真菌的平衡状态，能抑制有抗真菌作用的某些革兰氏阴性菌和能合成维生素B族的细菌的生长；维生素B族的缺乏也可导致细胞氧化作用的辅酶受抑，使组织抵抗力降低，因而有利于真菌生长。因此，采用此类药物治疗往往只能治标不能治本，并且甚至病情容易发生反复，而且抗生素类药物的滥用也会对人体造成损害，容易出现头痛、胃肠不适，长期用药有肝损害等副作用。

因此，在口腔念珠菌发病之前，就能够够快速鉴定所述的菌株，在治疗上具有重要的意义。

目前临床应用的念珠菌的检测方法有以下几种：

常规涂片镜检是最基本的细菌学检查方法。其优点是简便、快速和价廉，当天出结果；缺点是敏感性低，特异性差，无法辨别死菌与活菌。通常需用科玛嘉念珠菌显色培养基进一步证实。

沙氏培养基是念珠菌感染诊断较为常用的培养基，但临床上念珠菌感染症有的为混合感染，不同的念珠菌在沙氏培养基上生长均呈现白色菌落，要进一步鉴定不同的菌种，有时还必须要做念珠菌的发酵试验和芽管试验，给实验室的诊断带来很大的不便。

科玛嘉(CHROMagar)培养基培养法，该培养基含有特殊显色物质，无需通过任何仪器，仅通过观察菌落颜色即能在24～48小时(大多为48小时，30～37℃)用肉眼对念珠菌等进行定性和定量分析。但是培养所用的时间相对较长，不利于快速诊断。