[发明专利]一种枣仁挥发油在小鼠毛发生长中的应用

权利要求书

1.一种枣仁挥发油在小鼠毛发生长中的应用，其特征在于，枣仁挥发油作为促进小鼠毛发生长的活性成分，灌胃给药和待生发部位涂抹同时进行；

枣仁挥发油小鼠灌胃给药用量为2.3g/Kg，小鼠待生发部位涂抹以枣仁挥发油为活性成分的外用生发制剂，所述外用生发制剂由甘油、丙二醇和枣仁挥发油组成，甘油和丙二醇的体积比为3:6.2，所述外用生发制剂中枣仁挥发油的含量为76mg/mL；

所述枣仁挥发油是采用如下步骤制备得到的：

(1)枣仁原料的预处理：在温度为60℃将枣仁烘干23h，粉碎过筛，粉末粒度为50-70目，备用；在步骤(1)中还包括将粉碎过筛后的枣仁原料依次进行碱浸泡、酸浸泡和缓冲溶液浸泡以及晾干步骤；碱浸泡使用的碱溶液是质量浓度为7wt％的碳酸钠溶液，每100g枣仁粉末的碱溶液用量为360mL，碱浸泡时间为9h，碱浸泡之后过滤；酸浸泡使用的酸溶液是质量浓度为11wt％的盐酸，每100g枣仁粉末的碱溶液用量为300mL，酸浸泡时间为2h，酸浸泡之后过滤；缓冲溶液浸泡使用的缓冲溶液是pH＝7.2的磷酸缓冲溶液，缓冲溶液浸泡时间为6h；

(2)装料：将预处理的枣仁原料和溶剂A一起加入超临界CO₂流体萃取装置的萃取釜中；本实施例中溶剂A为乙酸乙酯；溶剂A的用量为枣仁原料质量的25wt％；

(3)设定萃取釜、分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ的温度、压力；

萃取釜的萃取压力为32MPa，萃取温度为45℃；分离釜Ⅰ的分离压力为8.3MPa，分离温度为33℃；分离釜Ⅱ的分离压力为5.4MPa，分离温度为36℃；

(4)静态萃取：通入一定量的CO₂使得萃取釜内升至步骤(3)中的设定压力，先以溶剂A为夹带剂进行静态萃取，静态萃取时间为0.7h；

(5)动态一次萃取：调控CO₂的流量为1.4L/min，再以溶剂A为夹带剂进行动态一次萃取，动态一次萃取时间为1.5h；

(6)动态二次萃取：调控CO₂的流量为1.4L/min，最后用夹带剂泵向萃取釜中加入溶剂B作为夹带剂进行动态二次萃取，动态二次萃取时间为2.2h；溶剂B为正丁醇和叔丁基甲基醚的混合物，正丁醇和叔丁基甲基醚的体积比为1:3，溶剂B的用量为枣仁原料质量的80wt％；

(7)在分离釜Ⅰ中分离时间为2.5h，在分离釜Ⅱ中分离时间为1.5h，将分离釜Ⅰ和分离釜Ⅱ得到枣仁挥发油合并；

(8)柱层析分离纯化步骤(7)中得到的枣仁挥发油，a)色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm×50mm,1.7μm；b)流动相由A相和B相组成：A相为：甲醇，B相为：1mmol/L甲酸铵水溶液；c)梯度洗脱条件：初始时A相与B相体积比为10:1,1分钟时A相与B相体积比为8:3,3分钟时A相与B相体积比为7:4，6分钟时A相与B相体积比为6:5，9分钟时A相与B相体积比为5:6，12分钟时A相与B相体积比为4:7，15分钟时A相与B相体积比为3:8，18分钟时A相与B相体积比为1:10，开始收集时间：1min，结束收集时间：18min；d)柱温：35℃；e)流速：0.6mL/分钟；除去流动相得到枣仁挥发油纯品。