[发明专利]一种光果姜种子无菌萌发与增殖的方法

说明书

技术领域

本发明属于草本植物种子萌发与增殖技术领域，尤其涉及一种光果姜种子无菌萌发与增殖的方法。

背景技术

光果姜(ZingibernudicarpumD.Fang.)为姜科姜属多年生草本植物，分布于我国的海南和广西，喜温暖、阴湿的环境和微酸性、肥沃的砂质壤土。较耐寒，冬季能耐0℃低温。株高1.5-2米，花期5-8月，果期7-9月。穗状花序从根茎直接抽出，长8-15厘米，形似红烛，花序上点缀着紫红色的小花，极为美丽，具有极高的观赏价值，宜做切花或室内盆栽观赏，也可在园林中种植。目前光果姜仍处于野生状态，尚未有开发利用。

光果姜用种子播种土壤，出芽率极低，不足5﹪，可用分切根状茎繁殖。用根状茎繁殖其繁殖系数小，且受时间限制，需种量较多，因此难以快速繁殖种苗进行人工栽培应用。本发明是一种用种子进行无菌播种诱导发芽，继而利用芽增殖扩繁快速繁育种苗的方法。

本发明要解决的技术问题是：种子的采集与处理；种子的消毒灭菌方法；种子萌发和诱芽培养基配方的研制；芽增殖培养基配方的研制。

发明内容

本发明的目的在于提供一种光果姜种子无菌萌发与增殖的方法，旨在解决种子的采集与处理；种子的消毒灭菌方法；种子萌发和诱芽培养基配方的研制；芽增殖培养基配方的研制的问题。

本发明是这样实现的，一种光果姜种子无菌萌发与增殖的方法，该光果姜种子无菌萌发与增殖的方法包括以下步骤：

种子采集：于夏季7月中、下旬采集光果姜果实，贮藏备用；

种子消毒：用酒精棉檫拭果皮，去除果皮将种子取出置于无菌瓶中，用酒精消毒，再用汞浸泡，再进行无菌水冲洗；

种子预处理：将已消毒的种子切破种皮；

种子萌发和芽诱导培养：配制种子萌发和芽诱导培养基，将预处理后的种子接入种子萌发和芽诱导培养基中进行接种，萌芽；

芽增殖继代培养：配制芽增殖继代培养基，将萌发出的芽切分成单芽接入芽增殖继代培养基中进行继代增殖培养。

进一步，所述种子采集中于夏季7月中、下旬采集光果姜果实，果实置于冰箱中贮藏备用，贮藏温度4℃。

进一步，所述种子消毒中在超净工作台上用75﹪酒精棉檫拭果皮，去除果皮将种子取出置于无菌瓶中，用75﹪酒精消毒10s，再用0.1﹪升汞浸泡5min，无菌水冲洗5次。

进一步，所述种子预处理中用镊子和手术刀片配合将已消毒的种子切破种皮，不伤害种胚。

进一步，所述种子萌发和芽诱导培养中配制的种子萌发和芽诱导培养基为：

MS+6-BA5.0mg/L+蔗糖30g/L，pH值6.0。

进一步，所述种子萌发和芽诱导培养中配制种子萌发和芽诱导培养基，培养温度24℃-26℃，光照时间9h/d，光照强度1000lx，将预处理后的种子接入培养基中，接种22d后，开始萌芽，35d发芽率75％，40d后基部萌发出2-3个新芽。

进一步，所述芽增殖继代培养中配制的芽增殖继代培养基为：

MS+6-BA2.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L，pH值6.0。

进一步，所述芽增殖继代培养中配制芽增殖继代培养基，培养温度26-28℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx，将萌发出的芽用解剖刀切分成单芽接入培养基中培养，12d开始出现小芽，30d增殖系数达到4.76，以后每隔25-30d转入相同的配制的芽增殖继代培养基中继代增殖。

本发明提供的光果姜是一种观赏应用价值极高的野生花卉，进行种苗的快速繁育是实现其应用推广的重要手段，依靠种子直接播种到土壤和根状茎分切的传统繁殖方法则难以完成。光果姜种子土壤播种萌芽率极低且受时间限制，根状茎分切繁殖系数小，同样受到时间季节的限制，而且需要的繁殖材料多。光果姜的种子数量极多，本发明是用种子作为繁殖外植体，将种子消毒灭菌及破损处理后播种，在研制的萌发和诱芽培养基中萌发和诱芽，其发芽率达到75﹪，在研制的增殖培养基中快速繁殖芽，30天芽增殖倍数达到4.76倍，为光果姜种苗工厂化育苗奠定了基础。本发明种子处理简单，易于操作，极大提高了种子的发芽率，而且发芽和出苗整齐；增殖培养得到的丛生芽增殖倍率大；研制的培养基配方简单、成分来源广泛、易于操作和配制；种苗的繁育不受时间季节的限制可周年生产。本发明为光果姜野生种质资源的开发利用和研究奠定了基础，对资源的保存和保护也有着重要的现实意义。

附图说明

图1是本发明实施例提供的光果姜种子无菌萌发与增殖的方法流程图。

具体实施方式