[发明专利]阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统的制备方法和用途

权利要求书

1.一种阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统，其特征是所述的蛋白质选自等电点在酸性范围 内，具有低毒性、电正性和生物相容性的蛋白质，如：血红蛋白、珠蛋白，所述的阳离子聚 合物为聚乙烯亚胺、壳聚糖或者聚酰胺中的任意一种，其中，聚乙烯亚胺和壳聚糖优于其他 阳离子聚合物，最佳为分子量1000～2000的聚乙烯亚胺或分子量3000～20000的壳聚糖，蛋白 质和聚阳离子聚合物的质量比例为1:0.2～1:20，最佳比例为1:2～1:10。

2.根据权利要求1所述的阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统，其特征是可通过疏水作用和 静电作用负载紫杉醇、阿霉素、长春新碱、甲氨蝶呤、苯丁酸氮芥、顺铂、5-氟尿嘧啶等抗 肿瘤药物；还可通过静电作用负载基因类药物，如在真核细胞中表达的质粒DNA。

3.一种阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统的制备方法，其特征是①EDC缩合：将阳离子聚 合物和蛋白质溶于pH＝0.5～4的盐酸溶液中，阳离子聚合物和蛋白质的质量比为1:1～1:10，再 加入1M的盐酸溶液调节体系pH为4～6，加入1-(3-二甲氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 (EDC·HCl)，搅拌，室温反应20小时，反应结束后将反应产物透析，冷冻干燥；②戊二 醛交联：将血红蛋白溶于磷酸盐缓冲溶液中，加入1～100mM的戊二醛溶液，室温下搅拌反 应1小时，加入1～10倍当量的聚乙烯亚胺溶液，室温下搅拌反应5小时，加入硼氢化钠溶液 终止反应，体系透析，冷冻干燥；③京尼平交联：将阳离子聚合物和血红蛋白溶于缓冲溶液 中，加入1～100mM的京尼平溶液，室温搅拌反应10～72小时，体系透析，冷冻干燥。

4.一种负载药物的阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统的制备方法，其特征是①水溶性药物 的负载：称取一定量的蛋白质、阳离子聚合物以及抗肿瘤药物(阿霉素、长春新碱、顺铂或 5-氟尿嘧啶)溶液pH3～7的盐酸溶液中，加入1～100mM的戊二醛或京尼平溶液，室温下搅 拌反应5～72小时，体系透析；②难溶性药物的负载：移取10mL已经制备好的阳离子聚合 物-蛋白质纳米载体，搅拌下加入紫杉醇、甲氨蝶呤、苯丁酸氮芥的DMSO溶液，室温下搅 拌充分吸附10～48小时，体系透析；③基因药物的负载：将质粒DNA溶于灭菌水中，获得 溶液A；将阳离子聚合物-蛋白质纳米载体用pH7.4的磷酸缓冲溶液配制成1mg/mL的溶液， 得到溶液B；A和B按不同比例混合得到基因载体复合物。

5.权利要求1所述的阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统在荧光成像领域的应用。

6.权利要求1所述的阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统在药物递送领域的应用。

7.权利要求1所述的阳离子聚合物-蛋白质纳米载体系统在基因递送领域的应用。