[发明专利]一种米曲霉及其应用

权利要求书

1.一种米曲霉，命名为米曲霉11250，其保藏号为CGMCC 11320；以含有橘子皮的发酵底物发酵产生含有柚苷酶的发酵液；发酵液中还含有柚皮苷和柚皮素。

2.根据权利要求1所述的米曲霉，其特征在于，所产生的柚苷酶分子量为23 kDa，最适宜作用温度、pH分别为45℃、5.0。

3.根据权利要求1所述的米曲霉，其特征在于，所产柚苷酶能水解柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷、檞皮苷、芸香苷以及对硝基苯基鼠李糖苷。

4.一种权利要求1-3中任意一项权利要求所述米曲霉的用途，其特征在于，产生柚苷酶。

5.一种权利要求1-3中任意一项权利要求所述米曲霉产生柚苷酶的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将米曲霉11250进行斜面培养，得斜面菌种；

（2）取斜面菌种接种到种子培养基，在30℃、180rpm的条件下发酵培养48-96h，得含有柚苷酶的发酵液；

斜面培养基：

pH为6.0，每1L中含有以下成分：MgSO₄ 0.5g、KH₂PO₄ 1.5g、CaCl₂ 0.1g、(NH₄)₂SO₄ 1.5g、KCl 0.5g、KNO₃ 1.5g、酵母膏2g、桔皮粉15g、琼脂20g、水余量；

种子培养基：

pH为7.5，每1L中含有以下成分：麦芽糖15.1g、胰蛋白胨 10g、(NH₄)₂HPO₄ 20g、NaCl10g、柚皮苷10g、酵母提取物5g、水余量；或者，

pH 为6.0，每1L中含有以下成分：MgSO₄ 0.5g、KH₂PO₄ 1.5g、CaCl₂ 0.1g、(NH₄)₂SO₄1.5g、KCl 0.5g、KNO₃ 1.5g、酵母膏2g、桔皮粉7.5g、水余量。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所得发酵液通过离心分离、硫酸铵分级沉淀、Q Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析，得到电泳纯柚苷酶。