[发明专利]一种农药对蜜蜂的风险评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及农药风险评价方法，具体涉及一种农药对蜜蜂的风险 评价方法。

背景技术

蜜蜂是农业生产中主要的授粉物种。蜜蜂授粉可减少农药化肥的 施用，适宜生态农业和绿色农业的发展；对维护农业生物多样性、稳 定性具有重要生态功能。有研究显示：全球约87.5％的开花植物依靠 昆虫授粉，其中87种为主要粮食作物，占世界粮食总产量的35％，而 蜜蜂约占授粉昆虫总数的80％，无论是人工饲养还是野生存在，都在 作物授粉方面发挥着巨大作用。同时蜜蜂授粉所产生的经济效益也相 当可观，每年仅我国由蜜蜂传花授粉带来的经济效益就高达150亿元。 因此，蜜蜂具有重大的生态和经济价值。但蜜蜂对农药敏感程度极高， 滥用或误用农药都将破坏蜜蜂栖息地及其食物来源，从而对蜜蜂产生 严重威胁。1990年至今，因农药中毒导致蜜蜂死亡、蜂群数量骤减的 现象遍及北美、欧洲、亚洲等许多国家，已成为全球普遍关注的环境 污染与生物安全问题。

为保护生态系统健康，从源头控制高风险性农药对环境生物产生 的潜在不良影响，我国环保部、农业部也逐渐将农药对蜜蜂生物毒性 与安全性评价列为农药登记管理、农药使用环境安全管理的重要内容 之一，并制定了农药对蜜蜂急性毒性试验准则。但迄今为止，我国作 为农药生产和使用第一大国，并未建立完整的农药对蜜蜂安全性风险 评价体系。总体来看：我国农药对蜜蜂生物安全性风险评价工作比较 落后，表现在实验方法上缺乏亚慢性、慢性试验方法，评价体系缺乏 立体多层次实验。

农药对蜜蜂的风险评价，是研究农药对蜜蜂种群影响的科学方 式。为了正确、合理、科学地评价，各国相继制定了一系列的试验准 则和评价方式。如在初级风险评估方面美国制定了农药对蜜蜂的急性 接触毒性试验准则，但尚无急性经口毒性试验准则。

发明内容

本发明公开了一种农药对蜜蜂慢性10d饲喂毒性试验的方法和 药剂NOEC值的测定方法，完善了农药对蜜蜂安全性评估工作方法。

本发明的实验方案为：

一种农药对蜜蜂的风险评价方法，方法步骤如下：

(1)试验用蜂为1～3日龄的幼蜂；

(2)进行预试验：以供低于试药剂LC₅₀值设置4～8种浓度梯度配 置成含药糖水对幼蜂进行连续10天饲喂，每个浓度3次重复，每 个重复10只幼蜂；

(3)正试验：根据预试验结果范围，将供试药剂先用溶剂溶解 后，再用50％蔗糖水溶液稀释并配制成含药糖水连续10天对幼蜂 进行饲喂；设空白对照组、溶剂对照组各15次重复，处理组10 次重复，每个重复10只幼蜂；试验期间每隔24±1h更换含药糖水， 每天饲喂前后用分析天平对饲喂管进行称重，以获得每24h糖水 消耗量；

(4)试验开始后连续观察幼蜂的死亡数、亚致死作用、异常行 为；记录各处理组每天的食物摄取量及整个实验期间的累积摄取 量；

(5)药剂对幼蜂NOEC值的测定：不可见效应浓度(NOEC)值用 通过方差分析得出：若与空白试验组没有显著性差异的最高浓 度，即为NOEC值；或通过浓度-效应关系得出：与空白实验组 相比，根据实验测试所得的浓度-效应关系，其影响程度低于空 白的10％的浓度，即视为NOEC值；LOEC值的测定：最低可见 效应浓度(LOEC)，通过供试物对幼蜂的毒性效应和空白对照 组相比有统计学显著性差异(p＜0.05)的最低浓度，及供试物 对供试蜜蜂有不利影响的最低浓度。

优选的，步骤(2)如下：进行预试验：以供试药剂LC₅₀值的 1/10～1/800设置4～8种浓度梯度配置成含药糖水对幼蜂进行连续10天 饲喂，每个浓度3次重复，每个重复10只幼蜂；

优选的，步骤(3)中，处理组以供试药剂LC₅₀值的1/10、1/50、 1/100、1/200、1/400、1/800的比例设置4～8种浓度梯度配置成含药糖 水对幼蜂进行饲喂。

优选的，步骤(1)中1～3日龄的幼蜂的收集方法为：待蜂王在新 脾上产卵之日算起，间隔19日左右将封盖子脾放入小暗盒中，然后将 小暗盒打小孔后放入温度控制在33±2℃，相对湿度60～80％，黑暗条 件下的人工气候箱，待新蜂出房，用毛刷将其刷入幼蜂饲喂盒中，用 花粉和花蜜混匀后喂食1～3天，收集幼蜂。