[发明专利]抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体及应用该抗体的免疫层析试剂盒

说明书

本发明涉及抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体及应用该抗体检测人呼吸道合胞病毒的免疫层析试剂盒，抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体是分别识别人呼吸道合胞病毒N蛋白21‑34位以及226‑239位氨基酸所组成的两个线性抗原表位的抗体，人呼吸道合胞病毒N蛋白在GenBank序列号是AAB59852.1；人呼吸道合胞病毒N蛋白21‑34位以及226‑239位的氨基酸序列分别为SKYTIQRSTGDSID及FGIAQSSTRGGSRV。本发明所提供的两种兔抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体具有特异性好、纯度高、效价高、制备成本低廉的特点。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体及应用该抗体检测人呼吸道合胞病毒的免疫层析试剂盒。

背景技术

呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Virus，RSV)是一种RNA病毒，属副粘液病毒科。该病经空气飞沫和密切接触传播。多见于新生儿和6个月以内的婴儿。潜伏期3～7日。婴幼儿症状较重，可有高热、鼻炎、咽炎及喉炎，以后表现为细支气管炎及肺炎。少数病儿可并发中耳炎、胸膜炎及心肌炎等。成人和年长儿童感染后，主要表现为上呼吸道感染。

WHO数据显示，全球每年的呼吸道合胞病毒感染者约有6400万例，16万例死亡。近十年来合胞病毒肺炎及毛细支气管炎占我国婴幼儿病毒性肺炎第一位，其症状与副流感病毒肺炎、轻症流感病毒肺炎及轻症腺病毒肺炎临床上几乎无法区别，不做病原学检查，很难确诊呼吸道合胞病毒感染。因此建立简便、快速、可行、能早期诊断呼吸道合胞病毒感染的方法非常必要。

目前呼吸道合胞病毒的检测方法主要有3类：一是分离培养法，是证实感染的“金标准”，但由于培养周期较长，操作步骤较多，导致该法在临床上不能进行快速诊断；二是血清学方法，即采用酶联免疫法、胶体金免疫法、微量免疫荧光法和间接血凝试验等，检测被检者血清中呼吸道合胞病毒抗体水平，可间接提示呼吸道合胞病毒感染的存在。然而，血清学试验只能提供一种回顾性的诊断，而且有时需要双份血清。另外，抗体出现的时机不易掌握，儿童、青少年与成人之间又存在呼吸道合胞病毒特异性抗体的差异，故现有血清学方法的检测质量受到一定限制；三是利用分子生物学技术检测呼吸道合胞病毒DNA的存在，其中最常用的是聚合酶链式反应(PCR)，该方法快速、灵敏、特异，是目前研究人呼吸道合胞病毒感染的重要手段，但由于PCR对实验设备以及操作要求较高，且易出现假阳性，在我国还不能作为常用的临床诊断方法。因此，建立人呼吸道合胞病毒特异性抗原的快速诊断方法十分必要。由于人呼吸道合胞病毒N蛋白序列上的高度保守性，使其成为了一个重要的检测标的。因此获得高特异性的抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体就是一个十分重要的工作。目前，关于抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体报道得最多的为相应的单克隆抗体及多克隆抗体。单克隆抗体最大的优点就是特异性高，但是制备方法繁琐，生产成本高，限制了其应用。多克隆抗体主要由基因工程表达的N蛋白免疫家兔等动物制备而成。其制备方法简单，成本低，但是其具有特异性低、效价低、纯度低等缺陷。因此，低成本的制备高特异性、高效价的抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体就显得十分重要。

发明内容

针对背景技术中存在的这些技术问题，本发明的目的在于提供识别人呼吸道合胞病毒N蛋白21-34位以及226-239位氨基酸所组成的两个线性抗原表位的两种抗体及应用该抗体的免疫层析试剂盒。

抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体，其特征在于：所述抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体是分别识别人呼吸道合胞病毒N蛋白21-34位以及226-239位氨基酸所组成的两个线性抗原表位的两种抗体，所述人呼吸道合胞病毒N蛋白在GenBank序列号是AAB59852.1；所述人呼吸道合胞病毒N蛋白21-34位的14个氨基酸以及226-239位的14氨基酸的氨基酸序列分别为SKYTIQRSTGDSID及FGIAQSSTRGGSRV；将人呼吸道合胞病毒N蛋白21-34位的14个氨基酸以及226-239位的14氨基酸的序列分别命名为N1及N2；所述抗人呼吸道合胞病毒N蛋白抗体是AbN1以及AbN2。