[发明专利]一种利用水产蛋白高温发酵制备绿色促生长饲料添加剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用水产蛋白高温发酵制备绿色促生长饲料添加剂的方法，属于水产品加工与利用领域。

背景技术

自20世纪50年代以来，在动物饲养和饲料中广泛使用抗生素、化学合成药物、激素、β-兴奋剂、重金属、镇静剂等促生长保健剂。抗生素等促生长保健剂在饲料中的应用历史由来已久,它创造了养殖业和饲料工业的革命,使得规模养殖在全世界范围内得到了迅速发展,动物的生产数量和饲料转化率得到大幅度提高。但是,正如所有工业文明的成果都有它的负面影响一样,长期以来使用化学促生长保健剂,导致了如下的问题：肉制品中药物残留严重，直接危害人体健康；肉制品品质下降，缺乏市场竞争力和信任感；细菌耐药性增强、耐药菌株增多，威胁人类安全；破坏生态环境等。随着饲料工业和畜牧水产业的迅猛发展，目前我国的畜产品和水产品已从短缺转变为阶段性过剩，人们更关心食品是否安全、卫生，因而绿色消费已成为今后的发展趋势，加之我国已加入ＷＴＯ，发达国家对我国出口的农产品要求越来越严格，目前药物残留问题成为我国畜产品和水产品走出国门的主要障碍之一。因此加速开发、推广和应用新型绿色饲料添加剂势在必行。

绿色饲料添加剂，最基本要求是无毒副作用、无残留，并且还要能促进动物生长。目前国际公认的促生长绿色饲料添加剂主要有以下几种：小肽、酶制剂、植物源产品及其提取物、微生态制剂、寡糖（化学益生素）和酵母类产品（天然益生元）等。

酶制剂作为一种饲料添加剂具有无残留、无污染，提高饲料的利用价值，改善动物生产性能和产品品质等作用。饲用酶制剂大致可以分为消化酶和非消化酶两类，通常在营养层面发挥作用。比如提高畜禽消化道内源酶活性，补充内源酶的不足；破坏植物细胞壁，提高饲料的利用效率；消除饲料中的抗营养因子，促进营养物质的消化吸收。目前，酶制剂已经广泛应用于饲料工业，主要有蛋白酶、非淀粉多糖酶和植酸酶等酶制剂。然而，市场上现有的饲用酶制剂多不耐高温，在饲料高温造粒过程中活性损失非常大。

国内外的研究结果表明，在日粮中添加一定的小肽可以改善机体对日粮中蛋白质和氨基酸的利用率，提高动物的生长性能。近年来，小肽作为一种绿色促生长饲料添加剂在饲料工业备受关注。目前小肽的制备方法有酶解法和微生物发酵法。酶解法生产活性肽是以蛋白原料为底物,运用蛋白酶的酶解作用，生产小分子肽。酶解法易于控制，作用条件温和适合活性肽的生产。但酶解法需要大量的蛋白酶，生产成本高。因此，酶解法制备活性肽多用于食品与医药行业，低端的饲用活性肽产品很少采用酶解的方法。微生物发酵法是以大分子蛋白质为原料，接入产蛋白酶的微生物，利用微生物发酵过程产生的蛋白酶的酶解作用，生成小分子肽。发酵法把蛋白酶的发酵生产和酶解过程有机结合在一起，降低了活性肽的生成成本，更适合活性肽的生产。专利CNZL200410029787.0“一种活性肽饲料添加剂及制备方法和用途”公开了一种发酵发制备小肽饲料添加剂的方法，它是以植物蛋白和动物蛋白的一种或几种的混合物，经芽孢杆菌等发酵降解，使其水解度控制在20～35％，然后经过后处理可得到小肽饲料添加剂。

小肽作为一种新型绿色促生长饲料添加剂在饲料工业有着很好的应用前景，然而目前小肽并没有在饲料工业得到广泛的应用。无论是酶解法生产的小肽，还是发酵法生产的小肽，高昂的生产成本制约了小肽在饲料工业的广泛应用。另外，现有技术制备的小肽产品其促生长成分只有小肽一种成分，过于单一，促生长性能不够突出。因此，亟需大幅度降低小肽的生产成本，以促进小肽在饲料工业的广泛应用。

发明内容

针对现有技术制备的小肽由于成本高，很难在饲料工业广泛的应用这一问题，本发明的目的是提供一种方法能够低成本地生产小肽。本发明的另一目的是通过采用耐高温地衣芽孢杆菌发酵制备小肽，使得制备得到的小肽产品还富含耐高温蛋白酶等酶制剂。这不但可以进一步提高小肽产品的促生长效果，而且还能通过生产出耐高温饲用酶制剂而进一步降低其生产成本。

为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：一种利用水产蛋白高温发酵制备绿色促生长饲料添加剂的方法，包括如下步骤：

（1）将斜面保藏的产耐高温蛋白酶的地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3接入到灭菌后冷却的LB液体培养基中，于55℃、150r/min培养12h，制备成地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）HL-3种子液备用；

（2）将新鲜的水产蛋白绞碎后备用，将植物饲料蛋白粉碎后过60目筛备用；