[发明专利]一种制备灵芝胞外多糖的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种制备灵芝胞外多糖的方法，具体涉及一种微 生物液态深层培养过程中提高胞外多糖产量的发酵工艺。

背景技术

灵芝(GanodermaLucidum)别名“瑞芝”、“仙草”，是一种药食两用的真菌， 在我国灵芝入药已有两千多年的历史。灵芝中含有多种生物活性成分，如多糖、三萜 类化合物、核苷类、生物碱类和甾醇类等，具有抗肿瘤、调节免疫、抗氧化和清除自 由基的作用，且对于慢性支气管炎、冠心病、糖尿病、神经衰弱等疾病都有一定的疗 效。灵芝多糖是灵芝主要的活性成分之一，具有调节机体免疫力、抗肿瘤、消除体内 自由基、抗氧化、抗衰老、保肝护肝、利胆清热、活血化瘀等功效。

灵芝多糖的来源主要有两种：人工栽培的灵芝子实体和孢子粉、液态发酵的灵芝 菌丝体。液态发酵灵芝菌丝体与人工栽培灵芝相比，具有周期短、产量大、产品质量 稳定等特点，且通过液体深层发酵培养灵芝菌丝体，所得的产品苦味小，营养价值及 有效成分不低于子实体甚至有些指标高于子实体，其中菌丝体中的粗多糖及多糖含量 均高于子实体。因此，灵芝液态发酵是目前国内外应用的一种工业化生产灵芝多糖的 方法。近年来，灵芝液态发酵的研究取得了很大的进展，但如何更进一步的提高灵芝 多糖的产量，降低生产成本，提高经济效益，成为一个亟待解决的问题。

可通过两种方法提高灵芝多糖的产量：一是对发酵培养基及发酵过程进行优化， 不同的培养基配方和培养条件能够影响菌丝体生长和活性成分如胞外多糖的积累。适 当的碳源、氮源、无机盐离子和生长因子种类和浓度，合适的培养基配比以及初始pH 值均有利于灵芝菌丝体的发酵和多糖的合成；二是在培养基中添加外源物质来促进胞 外多糖的合成，提高胞外多糖的产量。如HailongYang等(Stimulatoryeffectsof Coixlacryma-jobioilonthemycelialgrowthandmetabolitesbiosynthesis bythesubmergedcultureofGanodermalucidum.BiochemicalEngineeringJournal 76(2013)77–82)研究表明在发酵培养基中添加2％的薏米油，胞外多糖产量是未添 加薏米油时的2.2倍；谭才邓等(灵芝液体发酵产胞内多糖的培养基优化.现代食品 科技，2013，29(3)：549-552.)研究发现维生素B₁对灵芝菌丝生长与多糖含量影响 较大，且维生素B₁的最佳使用浓度为0.1％，此时菌丝生物量和多糖产量均达到最高。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备灵芝胞外多糖的方法。

本发明提供的制备灵芝胞外多糖的方法，包括如下步骤：

将灵芝菌种接种于发酵培养基中，培养；

所述发酵培养基由碳源、氮源、无机盐、提供木质素的原料和水组成。

所述碳源具体可为葡萄糖。

所述氮源具体可为酵母粉。

所述无机盐具体可为镁盐和钾盐。所述镁盐具体可为MgSO₄和/或水合MgSO₄。所 述钾盐具体可为KH₂PO₄和/或水合KH₂PO₄。所述水合MgSO₄具体可为MgSO₄·7H₂O。

所述提供木质素的原料具体可为汉麻杆粉或栎木粉。

所述发酵培养基中，葡萄糖的质量百分含量可为2.0-4.0％，酵母粉的质量百分含 量可为1.0-3.0％，镁盐的质量百分含量可为0.05-0.2％，钾盐的质量百分含量可为 0.1-0.3％，汉麻杆粉或栎木粉的质量百分含量可为0.5-5.0％。

所述发酵培养基中，葡萄糖的质量百分含量可为2.5-3.0％，酵母粉的质量百分含 量可为1.5％，镁盐的质量百分含量可为0.1％，钾盐的质量百分含量可为0.2％，汉麻 杆粉或栎木粉的质量百分含量可为1.0-3.0％。

所述发酵培养基具体可为如下(Ⅰ)至(Ⅷ)中的任意一种：