[发明专利]一种高效配子/胚胎玻璃化冷冻解冻方法

说明书

本发明涉及一种高效配子/胚胎玻璃化冷冻解冻方法，该方法使用的冷冻装置包括冷冻载体和用于装载配子或胚胎的勺状体，冷冻载体上开有多个通孔，勺状体放置在载体的通孔中并通过固定组件固定，勺状体的数量与载体通孔的数量相同；该方法包括以下步骤：A、在显微镜下，将经过冷冻保护的配子或胚胎装入勺状体的底部，然后迅速投入液氮中；B、在显微镜下，在液氮环境中，将勺状体置入冷冻载体的通孔中并通过固定组件固定；C、把冷冻载体放入支架后放入液氮罐；D、解冻步骤。本发明不仅能够提高冷冻效率，还大大节约用于购买液氮罐和液氮的花费。另外本发明勺状体厚实，且冷冻操作在显微镜下进行，不会造成胚胎或配子、卵母细胞丢失的现象。

技术领域

本发明涉及一种高效配子/胚胎玻璃化冷冻解冻方法。

背景技术

现有方法使用的玻璃化冷冻载杆是由高分子材料制成的前端平整的冷冻叶片，在使用的过程中是将卵母细胞或者胚胎放在叶片上进行冷冻保存，同时也便于以后需要的时候进行解冻复苏，但是该载体装置是在正常的视力的监视下完成的，将带有卵母细胞或者胚胎的叶片用液氮进行快速冷冻，并在其外面套上塑料管，然后再次投入到冷冻液中进行保存。

应用上述载体装置时存在的问题是：由于液氮温度-196度，需要将存放胚胎的叶片装在较长的手柄上，由于叶片较软，必须在叶片外面加入套管，这样就造成载杆横截面较大且较长，胚胎冷冻载杆长达21厘米左右。

一个冷冻支架仅可以存放7根载杆。每个载杆只能存放1-2个胚胎或者卵母细胞，如果一个病人胚胎或者卵母细胞冷冻载杆数目大于7根，则这个支架只能放置一个病人的卵母细胞或者胚胎，存放效率极低，无法充分利用液氮罐的存储空间。由于液氮为-196度，在液氮罐中也会随时产生损耗，每2天都需要重新将液氮罐注满。这样就造成液氮罐和液氮的极大浪费。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：提供一种能够提高冷冻效率、避免造成胚胎或配子丢失的高效配子/胚胎玻璃化冷冻解冻方法，采用该方法能够大大节约用于购买液氮罐和液氮的花费，解决了上述现有技术存在的问题。

解决上述技术问题的技术方案是：一种高效配子/胚胎玻璃化冷冻解冻方法，该方法使用的冷冻装置包括冷冻载体和用于装载配子或胚胎的勺状体，所述的冷冻载体上开有多个通孔，勺状体放置在载体的通孔中并通过固定组件固定，勺状体的数量与载体通孔的数量相同；

该方法包括以下步骤：

A、在显微镜下，先将经过冷冻保护的配子或胚胎装入勺状体的底部，然后迅速投入液氮中；

B、在显微镜下，在液氮环境中，将勺状体置入冷冻载体的通孔中并通过固定组件固定；

C、把冷冻载体放入支架后放入液氮罐即完成冷冻过程；

D、解冻时将冷冻载体从液氮罐中拿出后再从支架中取出，将勺状体从冷冻载体上取出，放入解冻液中取出胚胎或配子即可。

所述的勺状体上还连接有手柄。

所述的固定组件是位于载体通孔附近的固定杆，所述的勺状体的手柄底端面开有与固定杆配合的凹槽，勺状体放置在载体的通孔中，勺状体的手柄的凹槽套紧在固定杆上。

所述固定组件包括设置在通孔边缘的齿Ⅰ和设置在勺状体底面的齿Ⅱ，勺状体放置在载体的通孔中，勺状体底面的齿Ⅱ位于通孔边缘的齿Ⅰ内并配合卡紧。

所述的勺状体内表面设置有防脱层。

所述的通孔的数量为3～10个。

所述的通孔旁的载体上设置有相应的数字标号。

所述的冷冻载体的一端设置有用于标记胚胎或配子信息的标记段。

由于采用上述方法，本发明具有以下有益效果：