[发明专利]一种互叶白千层组培继代芽瓶外生根方法

说明书

本发明公开了一种互叶白千层组培继代芽瓶外生根方法，以常规组培方法扩增出互叶白千层的组培继代丛芽，再从中切取单芽，用于瓶外生根。切好的单芽在300～500 mg/L的市售ABT 2号溶液中浸泡30～50 min，之后蘸取相应浓度ABT 2号溶液与滑石粉混合的匀浆，移植至红心土基质中，培育30～35天可获得生根杯苗，生根率高达93.5～96.9%。本发明公布的方法简单易行，直接用组培继代芽进行瓶外生根，省略了瓶内生根及炼苗等环节，缩短了育苗时间，对于降低互叶白千层组培苗培育成本，规模化生产该树种组培苗有重要意义。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种互叶白千层组培继代芽瓶外生根方法。

背景技术

互叶白千层(Melaleuca alternifolia)，又名澳大利亚白千层，属桃金娘科(Myrtaceae)白千层属(Melaleuca.)，原产于澳大利亚南纬23.5°沿海地区及北方领地的北部等地区。我国的广东、广西、云南等地于1993年起先后成功引种互叶白干层。互叶白千层不仅是优美的庭院树、行道树和防风树，栽植一年后还可采收新鲜枝叶提取精油，称为茶树油。茶树油是优良的天然芳香剂、抗菌剂和防腐剂，广泛应用于制药、日化、食品、香料等行业，因此互叶白千层经济价值极高。

互叶白千层的繁殖方式包括种子繁殖、扦插繁殖和组培繁殖。种子败育多，发芽率低，种间差异大，致使优良种苗匮乏。互叶白千层扦插繁殖受季节、母株限制，占地面积大，繁育周期长，繁殖系数较低，大大地限制了其推广速度。组织培养是一种快速有效的无性繁殖途径，能有效扩增优良品种，受季节和地域的影响小，在短期内提供大量优质苗木。然而传统的组培繁殖要经过初始芽诱导、继代增殖、瓶内生根、炼苗和移栽等诸多工序，过程复杂，无菌操作要求高，人力物力电力消耗大，成本较高。

组培继代芽瓶外生根技术作为常规组培技术的简化版，近年来在一些树种的组培苗繁育过程中得到应用，但尚未见其在互叶白千层组培繁育过程中的应用报道。本发明将瓶内生根和炼苗移栽相结合起来，简化了程序，缩短了育苗周期，降低了育苗成本，为实现互叶白千层良种无性化育苗，推广这一优良树种提供了种苗保证。

发明内容

本发明的目的在于探索适宜的互叶白千层组培继代芽瓶外生根方法，主要目的在于降低互叶白千层组培苗培育成本。

本发明的上述技术问题主要是通过下述技术方案得以解决的：

一种互叶白千层组培继代芽瓶外生根方法，包括组培继代芽培养、育苗容器准备、继代芽移植、移植后管理。其具体操作步骤如下：

(1)组培继代芽培养：选取生长健壮无病虫的优树在头一年进行环割或伐桩促萌。选择当年生萌芽条作为外植体，经消毒后接种到诱导培养基上诱导初始芽，将获得的初始芽接种于继代培养基上进行增殖培养，得到组培继代芽；

(2)育苗容器准备：用地表20cm以下的红心土作为育苗基质，先将红心土用碎土机粉碎后过80～100目筛，装入Φ7×11cm的塑料杯，置于育苗床上；继代芽移植前用2～4‰的高锰酸钾溶液消毒24～36h，消毒后清水淋透备用；

(3)继代芽移植：选取丛生芽中生长健壮，高度≥3cm的继代芽洗去培养基，切成单芽，将切端用生根剂处理，用小木棍在育苗容器的育苗基质中央打孔，将处理后的继代芽垂直扦插于育苗基质中，压紧，然后用清水淋透；

(4)移植后管理：在育苗床上方用塑料薄膜搭建小拱棚，再盖上遮荫度为75～85％的遮阴网，10～15天后选阴天拆除小拱棚，生长期间保持充足的水肥。

以上步骤(1)所述外植体是选择长至30～40cm的萌芽条作为外植体；所述消毒用75％酒精、0.1％升汞按常规方法消毒。

以上步骤(1)所述诱导培养基的原料组分和质含量为∶改良MS+6-BA 2.8mg/L+IBA0.1mg/L+蔗糖30000mg/L+琼脂3000mg/L。