[发明专利]一种破囊壶菌的分离培养基及分离纯化方法

权利要求书

1.一种破囊壶菌的分离培养基，其特征是用下述方法制成：称取葡萄糖2g、酵母提取物1g、 蛋白胨1g、玉米浆1g、谷氨酸钠1g、琼脂20g、人工海盐33g于锥形瓶中，加入995ml超纯 水并搅拌均匀，115℃灭菌21分钟；无菌条件下，将温度降至50±5℃，加入5ml现配制的 经0.22um滤膜过滤的抗生素混合液，摇匀，倒平板，即得破囊壶菌的分离培养基；所述抗生 素混合液是用下述方法制成：称取氨苄西林0.5-1g，链霉素0.5-1.5g，制霉菌素5-20mg， 加超纯水至5ml，溶解并摇匀至溶液澄清，得抗生素混合液。

2.一种破囊壶菌的分离纯化方法，其特征是包括如下步骤：

用灭过菌的剪刀将潮间带红树植物腐败落叶剪成直径0.5-1.5cm碎片，用灭菌海水冲洗 2-3遍，贴于权利要求1的破囊壶菌的分离培养基上，于28±1℃培养，培养3天后，显微观 察破囊壶菌形态，将显微观察其形态为破囊壶菌的单菌落，用接种环将破囊壶菌单菌落挑至 新的破囊壶菌的分离培养基上划线纯化培养；长出单菌落后显微观察其形态；划线纯化培养 3-4次，得到纯培养的破囊壶菌单菌落。

3.一种破囊壶菌的分离纯化方法，其特征是包括如下步骤：

采集20ml潮间带红树林地区海水样品于培养皿中，撒0.5-1g松花粉，摇匀，于28±1 ℃培养1-2天，用接种环挑取花粉粒划线于权利要求1的破囊壶菌的分离培养基上，于28± 1℃培养，培养3-10天，显微观察破囊壶菌形态，将显微观察其形态为破囊壶菌的单菌落， 用接种环将破囊壶菌单菌落挑至新的破囊壶菌的分离培养基上划线纯化培养；长出单菌落后 显微观察其形态；划线纯化培养3-4次，得到纯培养的破囊壶菌单菌落。