[发明专利]一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂及制备方法

权利要求书

1.一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂，其特征在于，该制剂由紫杉醇、合成的TPGS- 还原性白蛋白以及注射用水等制成包载紫杉醇的纳米给药系统；其中所述TPGS-还原性白蛋白为0.5-5毫 克/毫升，紫杉醇浓度为0.025-1毫克/毫升，紫杉醇和TPGS-还原性白蛋白质量比为1∶5-1∶20。

2.按权利要求1所述的包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂，其特征在于，其使用牛血清白 蛋白作为载体合成材料，分子量为67kDa。

3.按权利要求1所述的包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂，其特征在于，其使用TPGS修 饰的还原性白蛋白为载体，分子量在67-87kDa。

4.一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂，其特征在于，所述方法包括以下制备步骤：

(1)合成TPGS修饰的还原性白蛋白

称取TPGS0.1g(0.065mmol)，丁二酸酐0.013g(0.013mmol)和DMAP0.08g(0.065mmol)，溶于无水 二氯甲烷5ml，氮气保护下，室温反应24h，旋转蒸发除去二氯甲烷，溶于纯水5ml，置于分子量为1000 的透析袋以纯水/乙醇(3∶1，V/V)水溶液透析24h，冻干处理得TPGS-COOH。

称取BSA200mg，加入PBS缓冲液(pH8.0)10ml溶解，加入DTT，加入量为BSA中二硫键摩尔量的5 倍(约0.04g)，反应4h，使用新沸水透析24h，冻干处理得Re-BSA。

称取TPGS-COOH69mg，溶于DCM5ml，加入EDC0.01g，NHS0.006g，(摩尔比1∶1.2∶1.2)，反应 8h，室温旋转蒸发抽干DCM，加纯水5ml，超声溶解，备用。称取Re-BSA50-400mg，溶于PBS8.0缓冲 液5ml，加入TPGS-COOH-NHS溶液，搅拌反应过夜，使用纯水/乙醇(9∶1)透析48h，冻干。

(2)制备包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒

采用超声透析方法制备包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒，取TPGS-还原性白蛋白适量加入注 射用水，超声分散成空白纳米粒。

取空白纳米粒5毫升，搅拌下向其迅速滴加紫杉醇的乙醇溶液1毫升。

然后上述溶液在低强度(200W)下超声10分钟，转移到分子量为14000的透析袋，使用纯水透析 24小时，得到产物在4℃、14000转/分钟条件下离心30min，除去离心上清液，再用蒸馏水重复洗涤离心 两次，所得纳米粒漩涡分散，得到载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒。

5.按权利要求4所述的一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂的制备方法，其特征在于， 步骤(1)中所述合成的TPGS-还原性白蛋白投料比TPGS∶Re-BSA为1∶1-1∶8，优选为1∶1-1∶2。

6.按权利要求4所述的一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂的制备方法，其特征在于， 步骤(2)所述TPGS-还原性白蛋白空白纳米粒浓度为0.5-5毫克/毫升，优选为1-2毫克/毫升。

7.按权利要求4所述的一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂的制备方法，其特征在于， 步骤(2)所述紫杉醇浓度为0.025-1毫克/毫升，优选为0.05-0.1毫克/毫升。

8.按权利要求4所述的一种包载紫杉醇的TPGS-还原性白蛋白纳米粒制剂的制备方法，其特征在于， 步骤(2)所述紫杉醇与TPGS-还原性白蛋白纳米粒质量比为1∶5-1∶20，优选为1∶10-1∶20。