[发明专利]一种软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法

说明书

本发明涉及植物花粉贮藏及离体培养活力检测领域，具体而言，涉及一种软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法，包括：采集软枣猕猴桃大蕾期花苞并取出花药；将所述花药干燥并过筛以收集花粉；将收集到的花粉密封并于‑85～‑75℃低温贮藏；将低温贮藏的花粉取出，置于室温下复温；将复温好的花粉均匀播撒于固体培养基上培养，随后在显微镜下镜检并统计花粉萌发率。该贮藏方法花粉经长时间保持后活力依旧保存良好，该花粉离体培养检测方法可用于软枣猕猴桃花粉活力检测，简单、迅速、精确。

技术领域

本发明涉及植物花粉贮藏及离体培养活力检测领域，具体而言，涉及一种软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法。

背景技术

软枣猕猴桃(Actinidia arguta(Sieb.&Zucc)Planch.ex Miq.)，又名软枣子、猕猴梨、藤瓜、藤梨，属于猕猴桃科，猕猴桃属大型落叶藤本植物。其果实较小，表面光滑，整果可食，是猕猴桃属中最耐寒的种之一。软枣猕猴桃享有“水果之王”的美誉，以其优良的品质、风味、丰富的营养成分、较高的医疗保健功效及良好的加工适性等特点，备受消费者青睐。软枣猕猴桃是世界很多地区尤其是寒冷地区极具发展前景的小浆果树种。

常规杂交育种是作物育种的重要途径之一，而花粉活力生活力决定了杂交的有效性。在自然状态下，软枣猕猴桃的生活力最多维持2周，如果杂交亲本之间花期不育或远距离杂交，育种工作者就需要采用一定的方法进行花粉贮藏，并保持花粉活力。因此研究软枣猕猴桃花粉贮藏条件及花粉活力检测方法对育种工作具有重要的应用价值。

软枣猕猴桃为雌雄异株植物，栽培生产中需同时配置雌株和雄株。但由于一些种植者对软枣猕猴桃特性缺乏了解，栽培过程中没有配置授粉植株，开花期授粉不良，降低了果实的产量及品质，严重者可导致绝产。因此研究软枣猕猴桃花粉的贮藏方法，可结合人工授粉方式，在不配置雄株的情况下仍能获得高品质的果实，同时由于减少了雄株的占地面积，可显著提高土地利用率，提高单位面积产量。

目前关于猕猴桃花粉贮藏方法有低温贮藏的报道，但研究最低温度仅限在-20℃条件，贮藏1年后花粉活力下降明显，而关于软枣猕猴桃花粉贮藏方法鲜有报道。

此外，目前测定花粉活力的方法主要有离体培养法、田间授粉法和染色法等3种。田间授粉法费事费力，染色法误差较大。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法，所述方法贮藏温度较传统方法更低，且花粉活力保持时间长，可解决贮藏1年后花粉活力下降明显的问题，适应软枣猕猴桃的花粉离体培养活力检测方法可解决现有方法费时费力，误差较大，操作复杂，不够精确的问题。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法，包括以下步骤：

1)、采集软枣猕猴桃大蕾期花苞并取出花药；

2)、将所述花药干燥并过筛以收集花粉；

3)、将收集到的花粉密封并于-85～-75℃低温贮藏；

4)、将低温贮藏的花粉取出，置于室温下复温后，将花粉均匀播撒于固体培养基上培养，随后在显微镜下镜检并统计花粉萌发率。

本发明提供的软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法，贮藏温度较传统方法更低，且花粉活力保持时间长，花粉活力保持的时间更久；后续的检测方法操作便捷，省时省力，且计数精确，易于操作。

具体的，花粉密封可置于密封的玻璃瓶或离心管中。

优选的，如上所述的软枣猕猴桃花粉贮藏及离体培养活力检测方法，在步骤1)中，所述采集软枣猕猴桃大蕾期花苞在晴天进行，且采集时间为早晨9:00～10:30。