[发明专利]一种用于保存唾液中DNA的组合物

说明书

技术领域

本发明属于生物医学领域，特别涉及一种用于保存唾液中DNA 的组合物。

背景技术

目前，基因检测已广泛应用于生物学、医学、法学、医药领域， 其通过对受检者血液、血清、血浆、唾液、尿液、其它体液、组织或 细胞等中的DNA的基因编码序列进行测定和定位分析，从而获知受 检者基因信息。基因检测对于遗传疾病的控制与预防、个体化用药方 案的制定、个人身份信息确认、亲子关系鉴定等具有重要意义，例如 可通过筛查药物性耳聋易感基因型，预防氨基糖甙类抗生素中毒性耳 聋；通过检测CYP2C19基因多态性，从而预测药物给药条件、毒副 作用的强弱和药物疗效；通过对个体MTHFR基因C677T位点基因 型进行检测可以提示个体发生脑卒中等心脑血管疾病及新生儿缺陷 的风险，并预测甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶等化疗药物的治疗疗效和毒副 作用；通过提取检测家属的DNA对死者身份进行辨认等。

用于提取DNA的体液通常为静脉血液中的白细胞，然而，采集 静脉血需专业人员操作，并且采用侵入式方式，会对人体造成一定程 度的创伤和不适，血液采集还可能存在交叉感染的风险，此外，血液 易于结块，不利于长时间保存，给提取带来许多不便。

从唾液中提取DNA相对于传统血液DNA采集方式来说，采集 过程简单方便，无需经专业训练的人员即可操作，且为非侵入式采集 方式，可避免对受检者造成不必要的痛苦，容易被接受，能更大限度 的扩大取样范围，尤其适合大规模人群调查。目前，从唾液中提取 DNA，主要是采用棉签擦拭或口腔拭子获取口腔黏膜脱落细胞，该 方法所采集的DNA量少，样品保存时间短，且需要低温保存，此外， 唾液脱离人体后容易发生变质、降解。因此，如何有效完整的保存唾 液样品，对于基于唾液中DNA的基因扩增和检测具有重要意义。

现有技术CN102440234A公开了一种人体唾液保存固定液，包括 蔗糖、Tris-HCl、MgCl₂、异硫氰酸胍和水，能够灭杀唾液中含有的 细菌、抑制核酶的活性。然而，该固定液组份中包含镁离子，属于核 酸酶激活剂，不利于DNA的稳定性保存；异硫氰酸胍虽然能够抑制 核酸酶的活性，但对细胞的破坏性较强，不利于DNA的完整性保存。

现有技术CN102676501A6公开了一种唾液DNA保存剂，包括 三羟甲基氨基甲烷、乙二胺四乙酸二钠、糖、氯化钠和表面活性剂， 其能够实现唾液中DNA的常温下长时间保存。然而，由于唾液样品 中存在脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶，能够分解DNA或RNA，较低 浓度的表面活性剂，难以充分抑制核酸酶的活性，可能影响DNA的 稳定性。

目前，存在开发出一种高效、稳定、常温下长时间用于保存唾液 中DNA的组合物的需求。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术存在的技术缺陷，提供一种高效、 稳定、常温下长时间用于保存唾液中DNA的组合物。

为了实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种用于保存唾液中DNA的组合物，包括变性剂、缓冲液、螯 合剂、氯化钠和聚乙二醇。

在本发明一具体实施方式中，所述变性剂为盐酸胍、苯酚和表面 活性剂中的一种或几种。其中，所述表面活性剂包括但不限于：十二 烷基硫酸钠(Sodiumdodecylsulfate，SDS)、十二烷基肌氨酸钠 (SodiumN-lauroylsarcosine，NLS)、聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)、吐温20(聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯)、吐温40(聚 氧乙烯失水山梨醇单棕榈酸酯)、吐温60(聚氧乙烯失水山梨醇单硬 脂酸酯)、吐温65(聚氧乙烯失水山梨醇三硬脂酸酯)、吐温80(聚 氧乙烯失水山梨醇单油酸酯)中的一种或几种。

在本发明一具体实施方式中，所述变性剂在组合物中的浓度按质 量体积百分比计大于30％，优选为30～60％，更优选为40～60％。

本发明实施方式中，通过变性剂抑制脱氧核糖核酸酶(DNA酶) 以及核糖核酸酶(RNA酶)的活性，并且不会导致DNA链的断裂， 保证唾液中DNA的完整性。

在本发明一具体实施方式中，所述变性剂包括盐酸胍。