[发明专利]一种基于pH响应阶段添加糖化酶发酵生产柠檬酸的方法

权利要求书

1.一种基于pH响应阶段添加糖化酶发酵生产柠檬酸的方法，包括将淀粉质原料进行调浆、液化、接种发酵，制得终发酵液，其特征在于：还包括在发酵培养过程中，当发酵液pH降至2.0~3.0时，向其中分阶段等量添加糖化酶的步骤。

2.根据权利要求1所述生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述分阶段等量添加为每间隔2~8h等量添加。

3.根据权利要求1所述生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述糖化酶的添加总量是基于所述发酵液中残余非葡萄糖的含量（残余总糖与残余葡萄的差值）来确定。

4.根据权利要求3所述生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述糖化酶的添加总量为40~1000U/g残余非葡萄糖量。

5.根据权利要求1所述生产柠檬酸的方法，其特征在于：所述淀粉质原料包括玉米粉、小麦粉、木薯粉、红薯粉、淀粉、糖蜜、小麦中的至少一种。

6.权利要求1~5任一项所述生产柠檬酸的方法，其特征在于具体包括以下步骤：

（1）将所述淀粉质原料粉末与水按照1:1.5~1:4比例混合均匀，调节pH至5.8~6.0，然后添加高温α—淀粉酶，所述淀粉酶添加量为15~50U/g粉末；

（2）将步骤（2）获得的混合料液经过两次喷射，一次喷射温度95~105℃，二次喷射温度120~130℃，经碘试合格，获得液化混液，再将所述液化混液经过板框过滤获得液化清液；

（3）将步骤（2）获得的液化混液与水混合，加氮源，调节混合液总糖为6~12%，总氮为0.2%~0.4%，得到种子培养基；

（4）将黑曲霉孢子悬液接种步骤（3）中的种子培养基进行培养，得到成熟种子液；

（5）将步骤（2）获得的液化混液、液化清液与水混合，调节混合液的总糖为16~18%，总氮为0.05~0.15%，得到发酵培养基；

（6）将步骤（4）获得的成熟种子液接种至步骤（5）获得的发酵培养基中，培养20~32h；

（7）当上述发酵培养基发酵液pH降至2.0~3.0时，每间隔2~8h向其中等量添加糖化酶，添加总量为40~1000U/g残余非葡萄糖量；

（8）当上述发酵培养基还原糖浓度低于0.5%时结束发酵；

如无特殊说明，以上所述百分数均为重量百分数（wt%）。