[发明专利]一种铁皮石斛种子保存方法

说明书

技术领域

本发明涉及农业技术领域，具体涉及一种用离心管保存铁皮石斛种子的方法。

背景技术

铁皮石斛果实为蒴果，里面包含有几万粒粉末状的种子。人工繁育铁皮石斛种苗是采用种子通过无菌播种的方式获得，因此，获取保存完好成熟的铁皮石斛种子尤为重要。但在实际生产中，把采集后的整个蒴果直接存放于4℃的冰箱中，蒴果表皮极易变软、开裂，不利于无菌播种的操作，致使保存时间不长，保存时间一般不能超过一个月。因此，现有的铁皮石斛种子保存技术依然存在不足。

发明内容

本发明的目的是为解决现有的铁皮石斛种子保存时间短的问题，提供一种铁皮石斛种子保存方法。

本发明的技术方案是这样的：选择优质聚丙烯螺口离心管，采集颜色正常、饱满、成熟、无病虫害、未开裂的铁皮石斛蒴果,无菌水漂洗2-3次,再用0.1%的氯化汞溶液消毒10min，无菌水漂洗4-5次,将蒴果浸泡于75%的酒精中3min，用镊子夹着在酒精灯上烧干蒴果表面酒精后放置于经灭菌的无菌不锈钢小盘中。在小盘中用灭菌后的解刨刀轻轻把蒴果顶端切开，拧开经高温灭菌好的离心管盖子，把铁皮石斛种子轻轻抖放于离心管中，盖好瓶盖后拧紧。把装有铁皮石斛种子的离心管装在小盒子中放于4^oC冰箱保存。用离心管保存的铁皮石斛种子培育组培苗时，在超净工作台上，把离心管放于75%的酒精浸泡30s后,再用无菌水漂洗3次,无菌滤纸轻擦拭干表面即可拧开瓶盖，把种子撒播于培养基中。此过程中，注意瓶口表面不能碰触其他地方。

本发明的技术效果：采用本发明的技术方案的无菌离心管保存铁皮石斛种子，可以达到长时间保存的目的，而种子不会变坏，仍然具有生活力。使用该方案保存的种子播种后萌发率达90%以上，值得推广。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：

按以下步骤进行：

1、挑选离心管：选择优质聚丙烯螺口离心管，离心管规格为5ml。

2、离心管灭菌：将离心管用高压灭菌锅经121^oC高温灭菌30分钟。

3、挑选铁皮石斛蒴果：铁皮石斛蒴果应颜色正常、饱满、成熟、无病虫害、无损伤、未开裂。

4、种子灭菌分装：将采集到的铁皮石斛蒴果在超净工作台上用75%的酒精浸泡30s后,无菌水漂洗3次,再用0.1%的氯化汞溶液消毒10min，无菌水漂洗5次,将蒴果浸泡于75%的酒精中3min，用镊子夹着在酒精灯上烧干蒴果表面酒精后放置于经灭菌的无菌不锈钢小盘中。在小盘中用灭菌后的解刨刀轻轻将蒴果顶端切开，拧开灭菌好的离心管盖子，把铁皮石斛种子轻轻抖放于经灭菌的离心管中，盖好瓶盖后拧紧。

5、种子的保存：把装有铁皮石斛种子的离心管放入离心管存放盒中后放于4^oC冰箱保存。

6、种子的使用：用离心管保存的铁皮石斛种子培育组培苗时，在超净工作台上，把离心管放于75%的酒精浸泡30s后,再用无菌水漂洗3次,无菌滤纸轻擦拭干表面即可拧开瓶盖，把种子撒播于于培养基中。此过程中，注意瓶口表面不能碰触其他地方。

实施例2：按以下步骤进行：

1、挑选离心管：选择优质聚丙烯螺口离心管，离心管规格为5ml。

2、离心管灭菌：将离心管用高压灭菌锅经125^oC高温灭菌25分钟。

3、挑选铁皮石斛果实：铁皮石斛蒴果应颜色正常、饱满、成熟、无病虫害、无损伤、未开裂。

4、种子灭菌分装：将采集到的铁皮石斛蒴果在超净工作台上用75%的酒精浸泡30s后,无菌水漂洗2次,将蒴果浸泡于75%的酒精中5min，用镊子夹着在酒精灯上烧干蒴果表面酒精后放置于经灭菌的无菌不锈钢小盘中。在小盘中用灭菌后的解刨刀轻轻将蒴果顶端切开，拧开灭菌好的离心管盖子，把铁皮石斛种子轻轻抖放于经灭菌的离心管中，盖好瓶盖后拧紧。

5、种子的保存：把装有铁皮石斛种子的离心管放入离心管存放盒中后放于5^oC冰箱保存。

6、种子的使用：用离心管保存的铁皮石斛种子培育组培苗时，在超净工作台上，把离心管放于75%的酒精浸泡30s后,再用无菌水漂洗3次,无菌滤纸轻擦拭干表面即可拧开瓶盖，把种子撒播于于培养基中。此过程中，注意瓶口表面不能碰触其他地方。

实施例3：按以下步骤进行：

1、挑选离心管：选择优质聚丙烯螺口离心管，离心管规格为5ml。