[发明专利]生物反应器及其搅拌桨和使用其培养TIL细胞的方法有效
申请号: | 201610141281.1 | 申请日: | 2016-03-11 |
公开(公告)号: | CN105602901B | 公开(公告)日: | 2020-01-31 |
发明(设计)人: | 王一飞;陈海佳;葛啸虎;曾维杰 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12M3/00;C12M1/02 |
代理公司: | 11344 北京市盈科律师事务所 | 代理人: | 刘雪花 |
地址: | 510000 广东省广州市广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物反应器 及其 搅拌 使用 培养 til 细胞 方法 | ||
1.一种使用生物反应器培养TIL细胞的方法,其特征在于,搅拌桨外包裹有减小剪切力的材料;包括以下步骤:
用X-VIVO 15培养基将PBMC按照1×106cells/ml的密度接种于培养瓶中,添加1%培养基体积的TNF-α溶液、IL-2溶液以及OKT-3溶液,在37℃、5%CO2条件下培养,每2~3天补充适量的培养基和IL-2,当培养体系达到一定体积后,转入生物反应器中继续培养至两周;
所述TNF-α溶液的浓度为200ng/ml,IL-2溶液的浓度为300U/ml,OKT-3溶液的浓度为500U/ml;
所述减小剪切力的材料为医用硅胶管或食用橡胶管;
当培养体系大于500ml时,转入2L生物反应器中继续培养,
所述使用生物反应器培养TIL细胞的方法,在生物反应器中培养TIL细胞的条件为:溶氧量为50%,pH7.2,搅拌速度为45rpm。
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