[发明专利]一种比率型pH荧光探针及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种比率型pH荧光探针，其特征在于，该荧光探针的化学结构式如式Ⅰ所示：

其中，R为亚细胞器定位受体，该亚细胞器定位受体为中的一种；

所述的荧光探针用于检测化学体系的pH值或生物活细胞内的pH值。

2.一种如权利要求1所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，当R为时，该方法具体包括以下步骤：

(1)在酸性溶剂中加入式Ⅱ所示化合物及式Ⅲ所示化合物，于110-130℃加热回流4-6h，后经蒸馏，即得到式Ⅴ所示化合物，该过程化学反应式如下所示：

(2)在有机溶剂A中加入式Ⅴ所示化合物及式Ⅵ所示化合物，于70-90℃加热回流11-13h，后经蒸馏，即得到式Ⅶ所示化合物，该过程化学反应式如下所示：

(3)在有机溶剂B中加入式Ⅶ所示化合物及对羟基苯甲醛，于75-95℃加热回流22-26h，后经蒸馏、提纯，即得到式Ⅰ所示化合物，即：

(4)将及缩合剂一起加入到有机溶剂B中，于室温下搅拌8-12h，后经水洗、蒸馏，即制得R为的pH荧光探针。

3.根据权利要求2所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，所述的缩合剂的摩尔比为1:1.1-1.3:1.4-1.8。

4.根据权利要求2至3任一项所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，所述的缩合剂为DCC/DMAP、DIC/DMAP、EDC/HOBt/NMM或HATU/NMM中的一种。

5.根据权利要求2至3任一项所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的式Ⅱ所示化合物、式Ⅲ所示化合物及酸性溶剂的摩尔比为1:1:8-10；

步骤(2)所述的式Ⅴ所示化合物、式Ⅵ所示化合物及有机溶剂A的摩尔比为1:1.2:8-10；

步骤(3)所述的式Ⅶ所示化合物、对羟基苯甲醛及有机溶剂B的摩尔比为1:1.1:8-10。

6.根据权利要求5所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，所述的酸性溶剂为冰醋酸，所述的有机溶剂A为乙腈，所述的有机溶剂B为N,N-二甲基甲酰胺。

7.一种如权利要求1所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，当R为时，该方法具体包括以下步骤：

(1)在酸性溶剂中加入式Ⅱ所示化合物及式Ⅲ所示化合物，于110-130℃加热回流4-6h，后经蒸馏，即得到式Ⅴ所示化合物，该过程化学反应式如下所示：

(2)在有机溶剂A中加入式Ⅴ所示化合物及式Ⅵ所示化合物，于70-90℃加热回流11-13h，后经蒸馏，即得到式Ⅶ所示化合物，该过程化学反应式如下所示：

(3)在有机溶剂B中加入式Ⅶ所示化合物及对羟基苯甲醛，于75-95℃加热回流22-26h，后经蒸馏、提纯，即得到式Ⅰ所示化合物，即：

(4)将及缩合剂一起加入到有机溶剂B中，于室温下搅拌8-12h，后经水洗、蒸馏，即制得R为的pH荧光探针。

8.根据权利要求7所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，所述的缩合剂的摩尔比为1:1.1-1.3:1.4-1.8。

9.根据权利要求7至8任一项所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，所述的缩合剂为DCC/DMAP、DIC/DMAP、EDC/HOBt/NMM或HATU/NMM中的一种。

10.根据权利要求7至8任一项所述的一种比率型pH荧光探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述的式Ⅱ所示化合物、式Ⅲ所示化合物及酸性溶剂的摩尔比为1:1:8-10；

步骤(2)所述的式Ⅴ所示化合物、式Ⅵ所示化合物及有机溶剂A的摩尔比为1:1.2:8-10；

步骤(3)所述的式Ⅶ所示化合物、对羟基苯甲醛及有机溶剂B的摩尔比为1:1.1:8-10。