[发明专利]一种人源脂肪干细胞的诱导分化方法在审
申请号: | 201610142997.3 | 申请日: | 2016-03-14 |
公开(公告)号: | CN105567637A | 公开(公告)日: | 2016-05-11 |
发明(设计)人: | 孙振华;曹晖 | 申请(专利权)人: | 厚朴生物科技(苏州)有限公司 |
主分类号: | C12N5/0793 | 分类号: | C12N5/0793;C12N5/0775;A61K35/30;A61P25/28;A61P25/00 |
代理公司: | 北京众元弘策知识产权代理事务所(普通合伙) 11462 | 代理人: | 孙东风 |
地址: | 215021 江苏省苏州市苏州工业园*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 脂肪 干细胞 诱导 分化 方法 | ||
1.一种人源脂肪干细胞的诱导分化方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将人源脂肪干细胞,采用SHH和RA共同诱导分化为运动神经元细 胞;
(2)将步骤2)中得到的所述运动神经元细胞体外培养,使其成长为 成熟的具有电生理功能的功能性运动神经元细胞。
2.根据权利要求1中所述的人源脂肪干细胞的诱导分化方法,其特征 在于,所述步骤(1)还包括采用特异神经细胞标记蛋白表征获得的所述 运动神经元细胞的步骤。
3.根据权利要求2中所述的人源脂肪干细胞的诱导分化方法,其特征 在于,所述特异神经细胞标记蛋白为HB9或Oligo2中的一种或两种。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的人源脂肪干细胞的诱导分化 方法,其特征在于,所述步骤(1)还包括利用电生理功能鉴定获得的所 述运动神经元细胞的步骤。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的人源脂肪干细胞的诱导分化 方法,其特征在于,所述步骤(2)具体为:将步骤1)中得到的所述运 动神经元细胞与原代神经细胞及神经营养因子共体外培养,使其成长为成 熟的具有电生理功能的功能性运动神经元。
6.根据权利要求5中所述的人源脂肪干细胞的诱导分化方法,其特征 在于,所述神经营养因子为BDNF、GDNF、IGF中的一种或多种。
7.根据权利要求6中所述的人源脂肪干细胞的诱导分化方法,其特征 在于,对所述运动神经元细胞进行体外培养时,还用电生理检测各个阶段 运动神经元的电生理活性及与原代神经细胞建立联系的状况。
8.一种采用权利要求1-7中任意一项所述的方法得到的功能性运动 神经元细胞。
9.权利要求9所述的功能性运动神经元细胞在制备治疗运动神经元 损伤或退行性疾病的药物领域的应用。
10.权利要求9所述的功能性运动神经元细胞在制备治疗脊髓损伤的 药物领域的应用。
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