[发明专利]一种经血源干细胞制剂及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种经血源干细胞制剂及其制备方法与应用。本发明提供的经血源干细胞制剂，包括：经血源干细胞、白蛋白和生理盐水。实验表明，本发明提供的经血源干细胞制剂能够将经血源干细胞的存活率维持在99％以上，细胞大小均匀、形态均为梭型。0℃～4℃保存1个月后，细胞仍保持着良好的形态，没有出现体积变大等异常现象，存活率仍保持在95％以上，且经表面抗原检测，经血源干细胞仍保持干细胞的特点，没有发生分化，具有良好的活性。以本申请提供的经血源干细胞制剂用于治疗卵巢早衰能够具有良好的治疗效果，使用本发明提供的经血源干细胞制剂一周后，小鼠卵泡数量明显增加。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种经血源干细胞制剂及其制备方法与应用。

背景技术

卵巢早衰是指女性在40周岁以前，除妊娠外，由某种原因导致的闭经，以血清雌激素水平下降、促性腺激素水平升高为特征的疾病。据流行病学统计提示，女性40岁以前的发病率为1％，原发性必经中卵巢早衰占10％～28％，继发性闭经中卵巢早衰占4％～18％，且发病率呈逐年上升的趋势。卵巢早衰已成为当今妇女不孕症的主要病因之一，严重影响患者生活质量、增加社会经济负担。对于卵巢早衰的病因及发病机制较为复杂，尚不十分清楚。卵巢早衰的治疗主要采用激素治疗，但是有临床研究发现，以激素治疗卵巢早衰会增加乳腺癌、子宫内膜癌以及心血管疾患、中风的发病率。

近年来间充质干细胞移植治疗成为临床研究的热点，为卵巢早衰的临床治疗提供新的希望，并取得初步的疗效。目前虽然已有用骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞治疗卵巢早衰的报道，并取得一定的疗效，但是需要经过骨穿刺才能获取骨髓，对机体造成较大的身体创伤，同时骨髓含有复杂的细胞成分，干细胞在其中的含量较低，需要较长时间的扩增，并不是比较好的种子细胞；脐带干细胞虽然免疫原性低，但是如果早期没有储存间充质干细胞，只能采用异体干细胞移植，存在一定的风险。

近年来，日本科学家在女性经血中发现了具有多向分化潜能的干细胞，该干细胞可用于修复受损的心肌组织。2008年，美国科学家Patel等发现，从健康女性经血中可分离出来间充质干细胞，这些细胞具有多向分化能力，并将该细胞命名为经血源子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells,MenSCs)。MenSCs属于成体干细胞的一种，具有来源丰富、有效成分含量丰富、收集过程无创、增殖和分化潜能巨大、无伦理争论及废物回收利用等优点。同时，研究表明，宫内膜干细胞可以用于治疗卵巢早衰、子宫内膜疾病、预防衰老等功能，有望成为较为理想的种子细胞。但目前并未见关于经血源干细胞制剂的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种经血源干细胞制剂及其制备方法与应用，本发明提供的经血源干细胞制剂干细胞存活率高，性质稳定，对卵巢早衰的治疗效果良好。

本发明提供的经血源干细胞制剂包括：经血源干细胞、白蛋白和生理盐水。

生理盐水是指生理学实验或临床上常用的渗透压与动物或人体血浆的渗透压相等的氯化钠溶液。本发明采用的生理盐水是指质量分数为0.9％的氯化钠溶液，其与人体组织的渗透压一致，以其作为溶剂，不会对经血源干细胞产生损伤。

白蛋白(又称清蛋白，albumin，Alb)是血浆中含量最多的蛋白质，占血浆总蛋白的40％～60％。能够维持血浆胶体渗透压的恒定且承担一定的运输功能。以往的研究中表明，白蛋白可能会诱导干细胞的分化。但本发明通过实验证实，在经血源干细胞制剂中添加白蛋白可以为经血源干细胞提供营养，提高经血源干细胞在制剂中的存活率，且经血源干细胞制剂在低温保藏一个月后仍未见分化的迹象。

在一些实施例中，其中所述白蛋白的质量分数为1％～5％。

在一些实施例中，其中所述白蛋白的质量分数为3％。

在一些实施例中，其中所述白蛋白为人血清白蛋白。