[发明专利]一种弯曲菌六重PCR检测试剂盒在审
| 申请号： | 201610149734.5 | 申请日： | 2016-03-16 |
| 公开（公告）号： | CN105695585A | 公开（公告）日： | 2016-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张茂俊;王敏;张建中 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 102206 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 弯曲 菌六重 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.检测弯曲菌的引物组合，其特征在于，含有6对引物，其核苷 酸序列如SEQIDNO.1-12所示。
2.权利要求1所述的引物组合在制备弯曲菌检测试剂盒或检测试 剂中的应用。
3.一种弯曲菌检测试剂盒，其特征在于，含有权利要求1所述的 引物组合。
4.如权利要求3所述的弯曲菌检测试剂盒，其特征在于，其能够 鉴定空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、海鸥弯曲菌和乌普萨拉弯 曲菌。
5.如权利要求3所述的弯曲菌检测试剂盒，其特征在于，使用权 利要求1所述的引物组合，对待测细菌DNA进行PCR检测，
当PCR扩增片段出现816bp+300bp的两条带时，菌株鉴定为空肠 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+500bp的两条带时，菌株鉴定为结肠 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+435bp的两条带时，菌株鉴定为胎儿 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+250bp的两条带时，菌株鉴定为海鸥 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+200bp的两条带时，菌株鉴定为乌普 萨拉弯曲菌。
6.如权利要求3-5任一所述的弯曲菌检测试剂盒，其特征在于， 所述PCR的反应程序为：
94℃5min；
94℃1min，64℃1min，72℃1min，共2个循环；
94℃1min，62℃1min，72℃1min，共2个循环；
94℃1min，60℃1min，72℃1min，共2个循环；
94℃1min，58℃1min，72℃1min，共2个循环；
94℃1min，56℃1min，72℃1min，共2个循环；
94℃1min，54℃1min，72℃1min，共30个循环；
72℃10min。
7.一种用于检测弯曲菌的靶基因组合，其特征在于，含有6条特 异性靶基因，其核苷酸序列分别如SEQIDNO.13-18所示。
8.权利要求7所述的靶基因组合在制备检测弯曲菌试剂盒中的应 用。
9.弯曲菌靶基因在制备检测弯曲菌试剂盒中的应用，其特征在于， 所述靶基因为SEQIDNO.13、SEQIDNO.14、SEQIDNO.15、SEQID NO.16、SEQIDNO.17和/或SEQIDNO.18。
10.检测食品、粪便中弯曲菌的方法，其特征在于，使用权利要求 1所述的引物组合，对待测食品、粪便标本中分离的菌株进行PCR检测，
当PCR扩增片段出现816bp+300bp的两条带时，菌株鉴定为空肠 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+500bp的两条带时，菌株鉴定为结肠 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+435bp的两条带时，菌株鉴定为胎儿 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+250bp的两条带时，菌株鉴定为海鸥 弯曲菌；
当PCR扩增片段出现816bp+200bp的两条带时，菌株鉴定为乌普 萨拉弯曲菌。
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