[发明专利]一个水稻未知膜蛋白基因OsMP1及其在抗病基因工程中的应用

权利要求书

1.水稻基因OsMP1在通过基因工程手段培育稻瘟病抗性品种中的应用, 所述的水稻基因OsMP1的cDNA 序列如SEQ ID NO. 1所示。

2.根据权利要求1 所述的应用，其特征在于包括如下步骤：

1）提取水稻抗稻瘟病菌品种“黑壳子粳”总RNA

2）水稻基因OsMP1的克隆

将步骤1）获得的总RNA 反转录合成cDNA第一链，以此为模板，P1 :SEQ ID NO.3 和P2 :SEQ ID NO.4为引物，用高保真酶进行PCR扩增后连接至pEASY-T1 Blunt载体，测序获得水稻基因OsMP1的cDNA 序列SEQ ID NO. 1；

3）植物表达载体的构建

根据水稻OsMP1基因的cDNA 序列SEQ ID NO. 1，设计扩增出完整编码阅读框的引物，并在上游引物P3 和下游引物P4 上分别同一引入限制性内切酶位点SpeⅠ，P3 和P4 引物序列分别为：SEQ ID NO.5 和SEQ ID NO.6；以步骤2）中获得的PCR 扩增产物为模板，经PCR扩增后，将OsMP1的cDNA利用引入的限制性内切酶位点SpeⅠ，通过重组法将OsMP1克隆到表达载体Ubi-pBA002，测序鉴定确保表达载体中编码区阅读框架正确；

4）转基因植株的获得

将步骤3）获得的表达载体Ubi-pBA002-OsMP1转入农杆菌，进一步转入水稻感稻瘟病菌品种“苏御糯”得到抗稻瘟病品种。