[发明专利]一种红曲霉菌体ACE抑制肽的纯化方法在审
| 申请号： | 201610151585.6 | 申请日： | 2016-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN105646646A | 公开（公告）日： | 2016-06-08 |
| 发明（设计）人： | 王伟平;成细瑶;胡川;鲁江 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C07K1/36 | 分类号： | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16 |
| 代理公司： | 武汉帅丞知识产权代理有限公司 42220 | 代理人： | 朱必武 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 曲霉 菌体 ace 抑制 纯化 方法 | ||
1.一种红曲霉菌体ACE抑制肽的纯化方法，其特征在于：该纯化方法包括以下步骤：
(1)红曲霉菌丝体ACE抑制肽干粉使用PBS缓冲液进行复溶；
(2)对复溶后的ACE抑制肽溶液进行离心，离心条件为3000r/min、5min，收集上清液 后使用0.22微米的水系微孔滤膜过滤，所得滤液采用葡聚糖凝胶柱层析，收集红曲霉菌丝体 ACE抑制肽活性组分峰；
(3)将步骤(2)收集的各组分收集液冷冻干燥后使用PBS缓冲液配成相同浓度，分别测 定各组分的ACE抑制活性；
(4)对步骤(3)中具有最高ACE抑制活性的组分E进行离心，离心条件为3000r/min、 5min，收集上清液后再使用0.22微米的水系微孔滤膜过滤处理，所得滤液采用RP-HPLC进行 进一步分离，条件为：进样量10mL，柱温25℃,流动相为超纯水，流速5mL/min,蛋白检测波 长为220nm；
(5)收集组分E经RP-HPLC分离所得的各活性组分峰，将各组分收集液冷冻干燥后使用PBS 缓冲液配成相同浓度，并分别测定各组分的ACE抑制活性。
2.如权利要求1所述的一种红曲霉菌体ACE抑制肽的纯化方法，其特征在于：步骤(2) 中所述的葡聚糖凝胶柱层析条件为：进样量10mL，柱温25℃,流动相为超纯水，流速1mL/min, 蛋白检测波长为280nm。
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