[发明专利]一种磷脂修饰的介孔硅纳米粒的制备方法

权利要求书

1.一种磷脂修饰的介孔硅纳米粒的制备方法，其特征在于所描述的介孔硅纳米粒可以是不带电荷的介孔硅纳米粒、带正电荷的介孔硅纳米粒以及带荧光的介孔硅纳米粒。

2.根据权利要求1所述的不带电荷介孔硅纳米粒的制备方法，其特征是：

称取十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)0.06～0.24g，加入到由20～50ml超纯水和1～10ml无水乙醇组成的混合溶剂中，于室温下搅拌10～20分钟。待CTAB溶解完全，向上述溶液中快速加入100～350μL氨水，搅拌片刻，缓慢滴加200～450μL正硅酸乙酯，继续搅拌3h，即得产物分散液。

向反应液中加入适量无水乙醇，1000～6000rpm离心2～25分钟收集沉淀，分别用去离子水和无水乙醇洗三遍，之后重新分散到50～400ml无水乙醇中，向其中加入3～33ml浓盐酸，37～80℃条件下回流1～5小时除模板剂，1000～5500rpm离心5～15分钟收集样品，再次分散到含有4～15ml浓盐酸的无水乙醇溶液中，55～75℃回流1小时，离心收集样品，依次用适量无水乙醇和去离子水洗三遍，收集备用。

3.根据权利要求1所述的带正电荷介孔硅纳米粒的制备方法，其特征是：

称取十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)0.30～0.90g，加入到由100～200ml超纯水和10～40ml无水乙醇组成的混合溶剂中，22～55℃条件下搅拌8～21分钟使CTAB全部溶解。向上述溶液中迅速加入0.1～2.4ml氨水，搅拌片刻，之后依次加入550～1000μL正硅酸乙酯(TEOS)和200～600μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)，继续搅拌3h，即得MSNs-NH₂的产物分散液。

向反应液中加入适量无水乙醇，1000～6000rpm离心2～25分钟收集沉淀，分别用去离子水和无水乙醇洗三遍，之后重新分散到50～400ml无水乙醇中，向其中加入3～33ml浓盐酸，37～80℃条件下回流1～5小时除模板剂，1000～5500rpm离心5～15分钟收集样品，再次分散到含有4～15ml浓盐酸的无水乙醇溶液中，55～75℃回流1小时，离心收集样品，依次用适量无水乙醇和去离子水洗三遍，收集备用。

4.根据权利要求1所述的带荧光介孔硅纳米粒的制备方法，其特征是：

精密称取1.0～5.0mg异硫氢基罗丹明(RBITC)，加入到4～14ml无水乙醇中，磁力搅拌2～5分钟使全部溶解，随后向其中加入150～550μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)，室温条件下避光搅拌过夜，即为APTES-RBITC。

称取0.48～0.88g十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)，加入到由100～200ml超纯水和10～40ml无水乙醇组成的混合溶剂中，22～55℃条件下搅拌8～21分钟使CTAB全部溶解。快速加入0.6～1.5ml氨水，搅拌片刻，依次加入正硅酸乙酯(TEOS)400～1500μL、3～13ml APTES-RBITC反应液，避光搅拌反应3小时，即得MSNs-RBITC产物分散液。

向反应液中加入适量无水乙醇，1000～6000rpm离心2～25分钟收集沉淀，分别用去离子 水和无水乙醇洗三遍，之后重新分散到50～400ml无水乙醇中，向其中加入3～33ml浓盐酸，37～80℃条件下回流1～5小时除模板剂，1000～5500rpm离心5～15分钟收集样品，再次分散到含有4～15ml浓盐酸的无水乙醇溶液中，55～75℃回流1小时.离心收集样品，依次用适量无水乙醇和去离子水洗三遍，收集备用。

5.根据权利要求1所述的一种磷脂表面修饰的介孔硅纳米粒的制备方法，其特征在于所描述的磷脂是含有各种离子基团的脂材，包括天然来源的大豆磷脂、卵磷脂以及人工合成的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇。

6.根据权利要求5所述的一种磷脂表面修饰的介孔硅纳米粒的制备方法，其特征是：

称取磷脂6～25mg，胆固醇2.5～6.0mg，用4～8ml氯仿溶解完全，于40～60℃条件下减压旋蒸铺膜，之后加入4～8ml去离子水，40～60℃条件下水化，探头超声2～30分钟，即得脂质体。

吸取300μL浓度约为1～45mg/mL的介孔硅纳米粒，加入0.6～2.5ml脂质体，每隔4～15分钟涡旋0.5～1.5分钟，孵育时长2小时。之后用14000rpm离心10分钟收集纳米粒，沉淀用适量去离子水洗三遍，探头超声分散。