[发明专利]用于确认2.5微米以下细微灰尘是否暴露的生物标记及利用其的确认方法

权利要求书

1.基因或其互补链分子在制造2.5微米(㎛)以下细微灰尘(particulate matter 2.5,PM2.5)暴露与否确认用微阵列芯片(microarray chip)中的用途，其特征在于，所述基因由下述组中的所有基因集成：

基因登记号NM_001163145，基因登记号NM_001081381，基因登记号NM_176952，基因登记号AK141429，基因登记号NM_144890，基因登记号NM_178626，基因登记号NM_199032，基因登记号NM_146023，基因登记号AK146791，基因登记号NM_197989，基因登记号NM_010200，基因登记号NR_003248，基因登记号NR_037689，基因登记号XM_001472451，基因登记号AK078977，基因登记号NM_001037906，基因登记号NM_001134480，基因登记号NM_008895，基因登记号NM_011198，基因登记号NM_028762，基因登记号NM_033354，基因登记号NM_001254731，基因登记号NM_199199，基因登记号NM_026454及基因登记号NM_026615。

2.根据权利要求1所述的基因或其互补链分子在制造2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认用微阵列芯片中的用途，其特征在于，所述2.5微米(㎛)以下细微灰尘是2.5微米以下细微灰尘的水溶性或有机性提取液。

3.基因或其互补链分子在制造2.5微米(㎛)以下细微灰尘暴露与否确认用试剂盒中的用途，其中所述试剂盒包含权利要求1所述的微阵列芯片。

4.根据权利要求3所述的基因或其互补链分子在制造2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认用试剂盒中的用途，其特征在于，

追加包含小鼠肺细胞或肺组织。

5.引物在制造2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认用试剂盒中的用途，其中所述引物与基因互补并能够对所述基因扩增，其特征在于，所述基因由下述组中的所有基因集成：

基因登记号NM_001163145，基因登记号NM_001081381，基因登记号NM_176952，基因登记号AK141429，基因登记号NM_144890，基因登记号NM_178626，基因登记号NM_199032，基因登记号NM_146023，基因登记号AK146791，基因登记号NM_197989，基因登记号NM_010200，基因登记号NR_003248，基因登记号NR_037689，基因登记号XM_001472451，基因登记号AK078977，基因登记号NM_001037906，基因登记号NM_001134480，基因登记号NM_008895，基因登记号NM_011198，基因登记号NM_028762，基因登记号NM_033354，基因登记号NM_001254731，基因登记号NM_199199，基因登记号NM_026454及基因登记号NM_026615。

6.一种非诊断目的的2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认方法，其特征在于，包括：

1) 在从作为实验组的检体分离的体细胞及从作为对照组的正常个体分离的体细胞中分离各个的RNA的步骤；

2) 在把步骤1)的实验组及对照组的RNA合成为cDNA的同时，将其用各个不同的荧光物质进行标记的步骤；

3) 使步骤2)的以荧光物质标记的cDNA与权利要求1的DNA微阵列芯片杂交的步骤；

4) 分析步骤3)的反应的微阵列芯片的步骤；及

5) 在步骤4)的分析的数据中，把实验组的集成于权利要求1的微阵列芯片的基因的表达程度与对照组进行比较确认的步骤。

7.根据权利要求6所述的2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认方法，其特征在于，

步骤1)的体细胞为小鼠的肺细胞或肺组织。

8.根据权利要求7所述的2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认方法，其特征在于，

所述肺组织为BALB/C小鼠肺组织。

9.根据权利要求6所述的2.5微米以下细微灰尘暴露与否确认方法，其特征在于，

步骤2)的荧光物质在由Cy3(青色素3)、Cy5、多聚L-赖氨酸异硫氰酸荧光素(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate)、罗丹明-B-异硫氰酸盐(rhodamine-B-isothiocyanate)及若丹明(rhodamine)构成的组中选择使用。