[发明专利]一种鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗YX10 D90株

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地，涉及一种鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗 YX10D90株。

背景技术

禽传染性支气管炎（Infectiousbronchitis，IB）是由禽传染性支气管炎病毒 （Infectiousbronchitisvirus，IBV）引起的鸡的一种急性、高度接触性传染的呼吸道疾 病。主要特征为病鸡呼吸道症状，肾脏肿大、苍白，有大量尿酸盐沉积，甚至外观呈“花斑 肾”；蛋鸡产蛋量和蛋的品质下降，幼雌鸡感染可引起输卵管永久性退化，导致产生“假母 鸡”。除此之外，部分IBV毒株还可以引起肠道、腺胃、肌肉的病变。IBV可感染所有日龄、绝大 多数种类的鸡，尤其是是1～5周龄的雏鸡非常易感，容易导致雏鸡生长迟缓、增重和饲料报 酬降低、甚至死亡；并易引起霉形体混合感染和大肠杆菌等继发感染，从而导致鸡群死亡率 增高，给全球养鸡业带来巨大的经济损失，IB是严重影响世界养禽业的重大传染病之一。

IBV属于套式病毒目（Nidovirales），冠状病毒科（Coronaviridae），冠状病毒属 （Coronavirus），为第三群禽冠状病毒的代表毒株。IBV为有囊膜的、不分节段的单股正链 RNA病毒。IBV最突出的特点是血清型众多，且不同的血清型相互之间没有或仅有很低的交 叉免疫原性。目前己经报道IBV的血清型或基因型至少有30多种，并且新的血清型、基因型 和变异株仍然不断出现，不同血清型和基因型间的交叉保护力很弱，这给IB的诊断、防治带 来了非常大的困难。

疫苗在IBV的预防中起着非常重要的作用，目前，在我国使用的疫苗主要有灭活 苗、弱毒苗。灭活苗主要在种鸡、蛋鸡开产前使用。但是仍存在灭活苗使用量大，需要配合佐 剂，制备复杂，成本较高等众多问题。除此之外，灭活苗还不能引起粘膜免疫和细胞免疫，因 此不能对气管提供有效的保护。弱毒活苗是由驯化好的毒株通过鸡胚的连续传代致弱后制 备的。弱毒苗能有效刺激机体的免疫系统，可以同时激发细胞免疫、粘膜免疫和体液免疫， 使用方便，生产成本低。一般我们主要用于肉鸡、种鸡和蛋鸡的首免。传支弱毒活疫苗从 1956年开始在荷兰使用，H52，H120是目前全世界应用最广泛的活疫苗。尽管我国一直广泛 使用Mass型疫苗（H120、H52），近年来肾型传支还是在国内频繁广泛的爆。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有疫苗株不能够有效防制鸡传染性支气管 炎病毒流行毒株的攻击，防制效果不理想的缺陷，提供一种鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗 YX10D90株。

本发明的第二个目的是提供所述鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗YX10D90株的应 用。

本发明的第三个目的是提供含有所述鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗YX10D90株 的药物。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的：

一种鸡传染性支气管炎弱毒活疫苗YX10D90株，在2016年3月14保藏于中国典型培养 物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：V201610，保藏地址为：中国，武汉，武汉大学。

发明人前期对2008～2015年中国分离株S1基因进行进化分析，结果与国内学者报 道一致，类QX型IBV已成为我国最主要的IBV基因型，占分离株60%左右。类QX型与我国常用 疫苗毒株（H120、H52、LDT3A、4/91等）S1基因相似度较低（70～85%），进化距离较远。进一步 研究发现，鸡群免疫国内主要弱毒疫苗（H120、H52、LDT3A、4/91等），然后用类QX基因型毒株 攻毒，表明商品疫苗毒株不能对目前的优势流行毒株提供足够的保护。

本发明所述弱毒活疫苗YX10D90株是由YX10强毒株经多次传代致弱，分离获得， 具体是使用9～11日龄SPF鸡胚对YX10株进行连续传代致弱，每个代次通过尿囊腔接种5枚 鸡胚，每胚接种200μL，置37℃孵育36～48h后，无菌收集鸡胚尿囊液，进行下一次传代。连续 传至90代，命名为YX10D90。

YX10D90株的生物学特征如下：病毒尿囊液无血凝性，接种9～11日龄鸡胚可致鸡 胚发育受阻或死亡，对SPF鸡无致病性，形态学观察为典型冠状病毒。

本发明还提供一种多肽，其氨基酸序列如SEQIDNO：2所示。

本发明还提供编码所述多肽的核苷酸序列，所述序列如SEQIDNO：1所示。