[发明专利]路德维希肠杆菌BG10-1及其在黄曲霉菌生物防治中的应用

说明书

本发明涉及路德维希肠杆菌BG10‑1及其在黄曲霉菌生物防治中的应用。路德维希肠杆菌BG10‑1于2016年1月7日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO:M 2016014，分类命名：Enterobacter Ludwiggi BG10‑1。路德维希肠杆菌BG10‑1是从广西贺州八步镇花生荚果中分离获得。经室内对峙拮抗实验、活体抑菌解毒实验和田间防治试验发现，该菌株对黄曲霉菌抑菌能力较强，容易培养，无污染，对环境安全。施用本微生物菌肥能有效防治黄曲霉菌对花生的污染。

技术领域

本发明涉及一株路德维希肠杆菌BG10-1及其在黄曲霉菌生物防治中的应用。

背景技术

由曲霉属真菌(特别是黄曲霉)引起的毒素污染统称曲霉菌毒素污染，寄主范围广。曲霉特别是黄曲霉给花生、玉米、水稻及大豆等作物的安全生产带来严重危害，每年导致的经济损失高达数百亿美元。曲霉属真菌特别是黄曲霉菌能产生毒性极强的真菌毒素。黄曲霉毒素是广泛污染农产品的一类强致癌、剧毒性真菌毒素，包括B、G和M族，其中B1最普遍且毒性最强。人或动物食用受毒素污染的食品或饲料后会导致机体病变甚至死亡，严重威胁消费者健康与生命安全，制约农业产业发展与国际贸易。因此，加强我国花生、玉米及水稻等农产品中黄曲霉及毒素污染的防控刻不容缓。

目前，在对黄曲霉菌的防治中，化学防治占据重要的地位。化学防治不但成本高，且易污染环境，在防控病原菌的同时病原菌也易对化学药剂产生耐药性甚至抗药性。因此，加强黄曲霉菌生物防控的研究对我国农业产业及经济效益具有重要的意义。

发明内容

本发明的发明目的之一是针对花生中黄曲霉菌污染的问题及现有技术的不足，提供一株对黄曲霉菌有较好防效的路德维希肠杆菌菌株。

本发明的另一发明目的是提供由该菌株制备的微生物有机肥制剂、制备方法及其在黄曲霉菌生物防治中的应用。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

提供路德维希肠杆菌BG10-1，已于2016年1月7日保藏于中国武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC NO:M 2016014，分类命名：EnterobacterLudwigii BG10-1。路德维希肠杆菌BG10-1是从广西贺州八步镇花生荚果中分离获得。经室内对峙拮抗实验、活体抑菌解毒实验和田间防治试验发现，该菌株对黄曲霉菌抑菌能力较强，容易培养，无污染，对环境安全。

路德维希肠杆菌BG10-1菌株的分离及筛选方法如下：

选取罹病花生田中健康花生植株，连同花生植株及土壤一同带回实验室分离。超净工作台上将花生植株上部长有叶片的茎秆剪掉，轻轻抖掉荚果上附着且结合程度低的土壤，将健康荚果及其上附着牢固的土壤一起放入无菌水中，震荡30分钟，获得土壤悬浮液。将荚果从上述土壤悬浮液中无菌操作取出，用吸水纸吸干后用镊子夹至无菌天平上称重。将称重后 的花生荚果用自来水及牙刷洗净表面土壤至眼睛看不见为止，然后在无菌三角瓶中用3％次氯酸钠溶液浸泡10分钟，最后无菌水冲洗5次，沥干水分。用镊子夹出花生荚果，无菌操作掰开荚果，将果壳用无菌剪刀平均分成5等份，分别放置在牛肉膏蛋白胨培养基、PDA培养基平板中，于28℃恒温培养，每天观察菌落生长状况，并及时挑取特征差异明显、分离良好的单菌落，进一步纯化获得纯菌株，在牛肉膏蛋白胨斜面培养基上保藏备用。进行室内对峙拮抗实验、活体抑菌解毒实验和田间防治试验，从中筛选获得路德维希肠杆菌BG10-1。

路德维希肠杆菌BG10-1形态学特征：

对BG10-1细胞形态和菌落特征进行观察，均为革兰氏阴性短杆菌，无芽孢，好氧，菌落圆形，较小，边缘整齐，表明湿润粘稠，菌落乳白色。

生理生化特征：