[发明专利]一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法

权利要求书

1.一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于，其步骤如下：

（1）白果蛋白的分离纯化

取新鲜白果脱壳，冷冻干燥后，研磨过筛，用石油醚脱脂至脱脂完全为止，待石油醚完全挥发后，按1:15～20g/mL的比例加入pH7.4的浓度为0.2mol/L的Tris-HCl溶液进行蛋白提取，4℃下磁力搅拌24～48h，然后在4℃下5000r/min冷冻离心15min，上清液分别通过40和80g/100mL饱和度的(NH4)₂SO₄进行分级沉淀，4℃下5000r/min冷冻离心30min，沉淀用少量pH8.0的浓度为0.01mol/L的Tris-HCl溶液溶解，置于截留分子量为3.5kDa的透析袋中用相同的Tris-HCl溶液进行透析，透析液冷冻干燥后得到白果蛋白；

（2）高静压处理

取一定量的白果蛋白，用蒸馏水配制成浓度为40～60mg/mL的白果蛋白溶液，将其密封于双层聚乙烯塑料袋中，抽真空密封后，置于高压设备中，于25℃条件下进行高静压处理，处理压力范围为100～700MPa，处理时间均为20～30min；

（3）蛋白酶水解

取一定量上述高压处理后的白果蛋白样品，于90℃条件下热处理5min，然后用1mol/LHCl或1mol/LNaOH调节溶液的pH值至蛋白酶最适宜的水解pH，根据白果蛋白样品质量，按1～5%的质量比例加入蛋白酶进行水解，水解温度为蛋白酶最佳水解温度，水解时间为1～2h，水解结束后在95℃下灭酶活10min，然后将水解样品进行冷冻干燥，即得到低敏性白果蛋白粉。

2.如权利要求1所述的一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶或中性蛋白酶中的一种。

3.如权利要求1所述的一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的蛋白酶最适宜的水解pH，碱性蛋白酶为pH8.0，木瓜蛋白酶为pH6.5、胃蛋白酶为pH1.5，中性蛋白酶为pH7.0。

4.如权利要求1所述的一种高静压结合酶解法制备低敏性白果蛋白粉的方法，其特征在于：步骤（3）中所述的蛋白酶最佳水解温度，碱性蛋白酶为45℃，木瓜蛋白酶为55℃、胃蛋白酶为40℃，中性蛋白酶为45℃。