[发明专利]一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法

说明书

本发明公开了一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法。其包括(i)7～13.5％有机碳源，有机碳源为选自山梨醇与乳糖中的一种或两种、葡萄糖和可溶性淀粉，(ii)0.5～0.7％无机盐，无机盐包括NaCl和CaCO₃，和(iii)有机氮源，所述有机氮源为(1)1～6％的花生饼粉或(2)0.3～2％的酵母提取物；或(3)包括花生饼粉和酵母提取物，所述有机氮源的含量为3～4％，所述百分比为占所述发酵培养基的总体积的质量体积百分比。本发明所述的发酵培养基能够高产PF1022A。本发明所述的发酵生产PF1022A的方法采用了所述的发酵培养基，操作简单，有利于PF1022A的产业化生产。

技术领域

本发明涉及发酵工程领域，具体涉及一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法。

背景技术

PF1022A是半知菌无孢霉菌Rosellinia sp.PF1022产生的N-甲基-CODP(环状缩肽)类化合物。PF1022A是一种对动物低毒、防治谱广、效果好的驱虫药物，其是继大环内酯类驱虫药后，最有潜力的用于牲畜和宠物的一类驱虫药。

美国专利文献US09901393A1(公开日2002年4月18日)公开了一种转化PF1022A生产其衍生物emodepside的化学法。目前emodepside与吡喹酮的组合物Profender已上市，用于控制猫或狗胃肠道内的线虫和绦虫。随后emodepside与妥曲珠利的组合物Procox也已上市。

目前PF1022A合成有固相合成法和生物合成方法。但固相合成法步骤繁琐、工艺复杂，不适于大规模生产。而生物合成方法以及产生该物质的该培养基存在成分复杂、不稳定、不能显著提高PF1022A产量的缺陷。因此有必要研究新的培养基，以提高PF102A的产量及其可重复性，以期满足实际应用的需求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对目前的发酵培养基培养半知菌无孢霉菌Rosellinia sp.PF1022产生PF1022A的产量低的现状，提供一种生产PF1022A的发酵培养基及发酵方法。所述的发酵培养基大大提高了PF1022A的发酵单位，适用于PF1022A的工业化大规模生产。所述的发酵方法简便易行，极大地提高了PF1022A的发酵单位，适用于PF1022A的工业化大规模生产。

本发明通过对发酵培养基中有机碳源和有机氮源的改良，采用葡萄糖、可溶性淀粉和山梨醇与乳糖中的一种或两种的组合有机碳源，同时采用花生饼粉和/或酵母提取物作为有机碳源，能够大大提高PF1022A的产量，与现有技术中发酵培养基相比，将产量最高提高至180.7％。发明人还发现，当发酵培养基中的有机碳源为葡萄糖、可溶性淀粉和山梨醇时，或为葡萄糖、可溶性淀粉和乳糖时，能够更有效地提高PF1022A的产量。本发明改良的发酵培养基含有足够的营养成分，能够满足摇瓶实验的需要，也能将摇瓶发酵的结果放大到发酵罐中。同时本发明的发酵培养基的组分的价格很低，能够大幅度地降低生产成本。

本发明提供的技术方案之一是：一种生产PF1022A的发酵培养基，其包括，

(i)7～13.5％有机碳源，所述有机碳源为选自山梨醇与乳糖中的一种或两种、葡萄糖和可溶性淀粉，

(ii)0.5～0.7％无机盐，所述无机盐包括NaCl和CaCO₃，和

(iii)有机氮源，所述有机氮源为以下(1)～(3)中的一种：

(1)1～6％的花生饼粉；或者，

(2)0.3～2％的酵母提取物；或者，

(3)3～4％有机氮源，所述有机氮源包括花生饼粉和酵母提取物，

所述百分比为占所述发酵培养基的总体积的质量体积百分比。