[发明专利]拟南芥糖基转移酶UGT79B2在催化合成花青素鼠李糖苷中的应用

说明书

本发明公开了一种拟南芥糖基转移酶UGT79B2在催化合成花青素鼠李糖苷中的应用；其中所述拟南芥糖基转移酶UGT79B2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，所述花青素是花青素(cyanidin)和3‑O葡萄糖花青素(3‑O‑glucose cyanidin)。实验证实将本发明所述拟南芥糖基转移酶UGT79B2与所述花青素放于反应管中进行酶促反应，即可催化合成相应的花青素鼠李糖糖苷。本发明的公开为利用酶催化方法高效、专一性地合成花青素鼠李糖苷物质提供了可行的方法，本发明实施后将为花青素鼠李糖苷合成工业带来巨大经济效益。

技术领域

本发明涉及一种糖基转移酶的应用，尤其涉及一种拟南芥糖基转移酶UGT79B2在合成花青素鼠李糖苷中的应用；属于生物技术领域。

背景技术

花青素是植物体内一种非常重要的小分子物质，它对植物的生长发育有重要的调节控制作用。花青素是一种水溶性的花色素，在植物体内积累能够增加植物体对UV-B辐射和抗紫外，还能影响植物的花色。花青素有很多活跃的羟基，能够与各种糖类物质的羧基结合，失去一份子的水分，从而形成花青素的糖苷。目前鼠李糖的花青素糖苷常作为标准品被用在花青素糖基化修饰和人类保健等科学研究中。但是目前人们对鼠李糖花青素糖苷的获得主要是通过植物提取和化学合成的方法，从植物体内提取，很难分离到比较纯的目的糖苷，同时化学合成的方法，又比较费时费力。相比之下，生物酶法合成花青素鼠李糖苷则具有高效高产等优点。

植物体内有一类酶，被称为糖基转移酶，它们能将各种糖基转移到小分子上，从而改变小分子的生物活性。能被糖基化的小分子有植物激素、次生代谢物、多肽、蛋白、病原菌侵染物以及植物的内源和外源毒性物质。但检索发现：到目前为止，人们还没有找到一个糖基转移酶，能够转移鼠李糖到花青素分子上，有关合成花青素鼠李糖苷的糖基转移酶的文献还未有报道。

发明内容

(1)本发明的目的

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种拟南芥糖基转移酶UGT79B2在合成花青素鼠李糖苷中的应用。

(2)发明的技术方案

本发明所述的拟南芥糖基转移酶UGT79B2在以鼠李糖为糖供体，催化花青素(cyanidin)和3-O glucose花青素(3-O-glucose cyanidin)合成花青素鼠李糖苷中的应用。

其中：

所述拟南芥糖基转移酶基因UGT79B2的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述拟南芥糖基转移酶UGT79B2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。该糖基转移酶是通过糖基转移酶基因UGT79B2在大肠杆菌中表达和纯化后获得的。糖基转移酶基因UGT79B2是通过RT-PCR方法从拟南芥中克隆获得。

上述花青素是指花青素(Cyanidin)和3-O葡萄糖花青素(3-O-glucosecyanidin)。

实验证实，将本发明公开的拟南芥糖基转移酶UGT79B2与花青素和3-O葡萄糖花青素放于反应管中，按实施例2中所给出的条件进行酶促反应，即可催化合成相应的糖苷。其与已经报道的其它糖基转移酶不同的是，本发明所述糖基转移酶UGT79B2能专一性的转移鼠李糖。

(3)本发明实施后可能带来的有益效果

本发明在国内外首次公开了拟南芥糖基转移酶UGT79B2在以鼠李糖为糖供体，催化花青素(cyanidin)和3-O glucose花青素(3-O-glucose cyanidin)合成花青素鼠李糖苷中的应用。本发明的公开为通过体外酶催化的方法合成花青素的鼠李糖糖苷提供条件，实现了高效、专一性的合成鼠李糖花青素糖苷(见附图2至附图5)，克服了用提取方法或化学合成方法获得鼠李糖花青素糖苷物效率低下，费时费力的不足。本发明实施后将为花青素鼠李糖糖苷合成工业带来巨大经济效益。

附图说明