[发明专利]一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽及其制备方法和应用。杂合α螺旋型猪源抗菌肽，序列如序列表SEQ No.1所示。本发明首先将猪源抗菌肽PMAP‑36中N‑末端前16个氨基酸残基经过改造，然后与Fowlicidin‑2前15个氨基酸杂合得到抗菌肽PR‑FO，并将PR‑FO的羧基末端酰胺化以提高一个正电荷并增加肽的稳定性，序列如SEQ No.1所示。然后使用多肽合成仪，进行固相合成法合成抗菌肽PR‑FO。本发明的抗菌肽具有更高的抗菌活性，低细胞毒性，大大提高了细胞选择性。此方法为抗菌肽成为抗生素替代物奠定了可行的理论和实践基础。

技术领域

本项发明属于农业畜牧兽医应用领域，具体涉及一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽及其制备方法和应用。

背景技术

抗生素一直是人类治疗因病原微生物感染引起的疾病的有力武器，但是随着传统抗生素的大量使用，致病菌的耐药性逐渐增强，抗生素时代正逐渐走到尽头。目前最好的抗生素也逐渐失去效果，所以寻找新的抗菌药物已成为备受关注的焦点。尤其是近来关于超级细菌的报道，更为人们敲响了警钟。寻找一种新型绿色的饲料添加剂以替代抗生素，已经成为一个紧迫的任务。

抗菌肽种类繁多，在自然界中分布极为广泛，但是真正应用到医药及畜牧领域的例子却很少，限制抗菌肽应用的因素很多，其中对于某些抗菌肽来说抗菌活性低是限制其应用的主要影响因素。因此，在保证对正常细胞不产生毒性的前提下，寻找一种有效的提高抗菌肽抗菌活性的方法势在必行。杂合设计是一种很好的策略用来优化这些抗菌肽分子。这种方法能够很好的保留所需片段的生物学活性，而不被某一种参数的改变而影响。此外，由于只保留活性中心，因此这种方法能够明显的缩短肽链长度，降低化学合成成本。

发明内容

本发明的目的在于提供一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽及其制备方法和应用。本发明将改造过的猪源抗菌肽与α-螺旋型抗菌肽Fowlicidin-2进行杂合，从而得到全新的抗菌肽，以提高其抗菌效果。

本发明采用的技术如下：一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽，其序列如序列表SEQ No.1所示。

发明还具有如下技术特征：1、如上所述的一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽的制备方法如下：

(1)截取原肽PMAP-36中N-末端前16个氨基酸残基得到抗菌肽RI16，将其中第7位和第11位的氨基酸替换成色氨酸得到抗菌肽PRW4，如序列表SEQ No.2所示；

(2)将PRW4与α-螺旋型抗菌肽Fowlicidin-2的前15个氨基酸杂合得到抗菌肽PR-FO，并将PR-FO的羧基末端酰胺化以提高一个正电荷并增加肽的稳定性；

(3)采用固相化学合成法，通过多肽合成仪合成上述抗菌肽。

2、如上所述的一种杂合α螺旋型猪源抗菌肽在制备治疗革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌感染性疾病药物中的应用。

本发明的抗菌肽具有更高的抗菌活性，低细胞毒性，大大提高了细胞选择性。此方法为抗菌肽成为抗生素替代物奠定了可行的理论和实践基础。

附图说明

图1为本发明的抗菌肽对细菌细胞外膜的透化作用图。

图2为本发明的抗菌肽对细菌细胞内膜的透化作用图。

图3为本发明的抗菌肽的溶血活性图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1杂合化α螺旋型猪源抗菌肽序列的设计及合成