[发明专利]一种含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针及其应用

权利要求书

1.一种含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针，其特征在于，所述荧光探针为Rh-Gly荧光探针，其结构通式如(Ⅰ)所示:

其中，

R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₄＝H，R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝-CH₃；

或R₁＝R₂＝-CH₃，R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝R₄＝H；

或R₁和R₄一起形成-(CH₂)₃-，R₂和R₃一起形成-(CH₂)₃-。

2.权利要求1所述的一种含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)罗丹明甘氨酸甲酯的制备

称取罗丹明类化合物于圆底烧瓶中，加入1，2-二氯乙烷至完全覆盖烧瓶底部，加入三氯氧磷，加热反应3-5小时后，冷却至室温，加入甘氨酸甲酯的乙腈溶液，再向圆底烧瓶中逐滴滴入三乙胺，室温搅拌12-24h得反应液A；将反应液A用二氯甲烷萃取，取下层液，加入无水硫酸镁干燥，过柱提纯，得到白色固体；

(2)罗丹明甘氨酸(Rh-Gly)的制备

将白色固体溶于甲醇和过量的氢氧化钠溶液中，加热回流5-8小时后得反应液B，反应液B蒸干后，经柱层析提纯得到Rh-Gly荧光探针。

3.如权利要求2所述的含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针的制备方法，其特征在于，罗丹明类化合物与三氯氧磷的摩尔比为1:(3-6)。

4.如权利要求2所述的含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针的制备方法，其特征在于，所述罗丹明类化合物为罗丹明B，罗丹明6G，四甲基罗丹明TMR，罗丹明110或罗丹明101。

5.如权利要求2所述的含有甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针的制备方法，其特征在于，步骤1)中采用80-100℃的油浴加热反应3-5小时。

6.一种如权利要求1所述的含甘氨酸结构的罗丹明光控荧光开关探针，能够准确测定溶液中的pH，其pKa为5.8，pH检测范围为4.0-8.0。