[发明专利]浮萍室内培养与繁殖的方法

说明书

本发明提供了一种浮萍室内培养与繁殖的方法，包括以下步骤：将浮萍去根、灭菌后，置于Hoagland`s E+培养基中培养；选择培养后的一簇单克隆浮萍，在无菌环境下转接至无菌培养液中，继续培养。本发明提供了一种可操作的、实现浮萍在室内自然培养的方法，可为风险评价试验提供高质量的生物试材，有利于浮萍生物毒性试验的顺利开展。

技术领域

本发明涉及植物培养技术领域，尤其涉及一种浮萍室内培养与繁殖的方法。

背景技术

浮萍科植物是被子植物中最小和最简化的，以其生长迅速、营养价值高、生物产量高而著称，在生活污水处理、饲料和沼气生产中具有较大的作用。浮萍为漂浮水生维管束植物，全球广泛分布，多年来被用于植物生理学研究，近年来，国外许多学者已经就浮萍的应用进行了深入的水生生态毒理学研究，在国内，浮萍植物作为毒理学材料加以应用的报道尚属少见。

我国《化学品测试方法生物系统效应卷》中推荐使用浮萍作为试验物种，用于评价化学品及其有毒物质对水生植物的毒性。目前国内文献多是对浮萍生长条件及生长环境方面的研究，一般在水田池沼或其它静水水域中采用种子繁殖和分株繁殖的方法去进行种植，而大面积的繁殖与培养，很难保证检测试验中对浮萍质量的要求。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种可操作的、实现浮萍在室内自然培养的方法，可为风险评价试验提供高质量的生物试材，有利于浮萍生物毒性试验的顺利开展。

为解决上述技术问题，提供了一种浮萍室内培养与繁殖的方法，包括以下步骤：

S1、将浮萍去根、灭菌后，置于Hoagland`s E+培养基中培养；

S2、选择培养后的一簇单克隆浮萍，在无菌环境下转接至Hoagland`s E+培养基中，继续培养。

上述的方法，优选的，所述步骤S1中，所述Hoagland`s E+培养基的液面高度为5cm～10cm；培养过程中，每隔5天更换一次Hoagland`s E+培养基。

上述的方法，优选的，所述步骤S2中，所述的Hoagland`s E+培养基的液面高度为3cm；培养过程中，每隔2天更换一次Hoagland`s E+培养基。

上述的方法，优选的，所述步骤S1中所述灭菌具体为：将去根后的浮萍用0.1％次氯酸钠浸泡灭菌1min，再清水冲洗3次。

上述的方法，优选的，所述步骤S1中所述Hoagland`s E+培养基的pH为6～9。

上述的方法，优选的，所述步骤S1中，所述浮萍的培养密度为15～30叶/缸。

上述的方法，优选的，所述步骤S1中，所述步骤S1的培养条件为：温度24±2℃；采用全波长荧光灯照明，光照强度6500～10000Lux；光照比为16h/8h(光照条件下放置16h，黑暗条件下放置8h)。进一步的，所述全波长荧光等固定在距植株30cm～50cm的上方。

上述的方法，优选的，所述步骤S2中所述继续培养的条件为：温度24±2℃；光照强度6500～10000Lux；光照比为16h/8h(光照条件下放置16h，黑暗条件下放置8h)。

与现有技术相比，本发明的优点在于：

(1)本发明提供了一种浮萍室内培养与繁殖的方法，操作简单易行，成本低，该方法可保证浮萍的生长，存活率高，符合非洲浮萍的生活规律，可为药物安全性评价提供高质量的生物试材，可实现浮萍的批量培养。

(2)本发明提供了一种浮萍室内培养与繁殖的方法法，选取一簇单克隆浮萍，标记浮萍的名称品系及世代。