[发明专利]一组鉴别阿胶及其制品中驴源性成分的多肽

权利要求书

1.一组用于单独或任意组合检测阿胶及其制品中驴源性成分的多肽，所述的阿胶制品包括但不限于阿胶糕、阿胶膏、阿胶浆、阿胶口服液、阿胶糖、阿胶补血颗粒，所述的多肽的序列为：

肽段4：SEQ ID NO.4：GPPGPMGPPGIAGPPGESGR；

肽段10：SEQ ID NO.10：GPAGPTGPVGK；

肽段15：SEQ ID NO.15：GPPGPVGPPGIAGPPGESGR；

肽段27：SEQ ID NO.27：SGQPGTVGPAGVR。

2.根据权利要求1所述多肽，其特征在于，所述多肽对应的m/z值及子离子分别为：

肽段4：595.6；

肽段10：469.3；

肽段15：893.0；

肽段27：591.8；

。

3.一种检测阿胶及其制品中是否含有驴源性成分的检测方法，所述方法包括如下步骤：

步骤(1)，对待测样本进行质谱前处理，获得待测多肽滤液：

步骤(2)，通过质谱法检测步骤(1)获得的多肽滤液，检测待测样本中是否含有权利要求1或2所述肽段的质谱峰。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，步骤(1)所述的对待测样本进行质谱前处理，获得待测多肽滤液的步骤如下：

(1)将待测样品均质成粉末状态，称取0.1g～0.5g阿胶样品或1.0～2.0g阿胶制品，加入1％NH₄HCO₃溶液，超声处理10～30min使样品完全溶解，定容至50mL；

(2)溶液过0.22μm滤膜；

(3)取10～20μL浓度为1μg/μL的Trypsin酶溶液加入到上述100μL～200μL滤液中，37℃酶解16-18小时，待上机检测。

5.根据权利要求3或4所述的检测方法，其特征在于，步骤(2)通过质谱法检验步骤(1)获得的多肽滤液的方法是下述方法A或方法B：

方法A：采用AB SCIEX5600质谱检测多肽滤液中是否含有权利要求1或2所述的肽段的质谱峰，

上机参数为：

流动相A：0.05～0.2％甲酸-乙腈溶液，流动相B：0.05～0.2％甲酸-水，

流速：0.1～0.5mL/min，

TOF扫描范围：100-3000Da，

正离子反应模式，GS1：35，GS2：45，Curtain Gas：35，ISVF：5500，TEM：500，DP：100，CE：10；

方法B：采用AB SCIEX三重四级杆质谱检测多肽滤液中是否含有权利要求1或2所述的肽段的质谱峰，

上机参数为：

流动相A：0.05～0.2％甲酸-乙腈，流动相B：0.05～0.2％甲酸-水，

流速：0.1～0.5mL/min，

电喷雾离子源，正离子反应模式，检测方式：MRM，喷雾电压：5500V，离子传输管温度：475℃；鞘气压力：40；辅助气压力：6。

6.使用权利要求1所述的各个多肽或其任意组合以检测目标阿胶及其制品样本中是否含有驴源性成分的方法，所述方法包括：质谱法、高效液相色谱法、核磁共振法。

7.权利要求1所述的各个多肽或其任意组合在检测目标阿胶及其制品样本中是否含有驴源性成分中的应用，所述的阿胶制品包括但不限于阿胶糕、阿胶膏、阿胶浆、阿胶口服液、阿胶糖、阿胶补血颗粒。