[发明专利]一种除蛋白质去重金属的鲍鱼脏器多糖粉的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于海产品研究技术领域，具体涉及一种除蛋白去重金属的鲍鱼脏器多糖粉的制备方法。

背景技术

我国海洋资源丰富，海产养殖条件优越，是世界上最大的养鲍国家。由于鲍鱼腹足中含有丰富的蛋白质、钙、铁、维生素A等营养成分，并具有破坏癌细胞、平衡血压、滋阴清热、明目等功效，同时其肉质柔嫰细滑，滋味鲜美，备受国内外消费者的青睐，市场需求量也日益提高。

通常情况下，鲍鱼加工和食用一般以腹足为主，而占鲍鱼干重1/3的鲍鱼脏器被直接丢弃，严重污染环境。而研究表明，鲍鱼脏器组织中含有丰富的多糖、蛋白、多肽等活性物质，将其直接丢弃还造成了资源的浪费。为了变废为宝，研究学者针对鲍鱼脏器中多糖物质进行提取并对其功能活性进行研究，结果表明鲍鱼脏器多糖具有抗氧化、消炎、抗疲劳、抗癌等活性，是一种潜在的功能活性物质。

目前多糖制备的方法有热水浸提法、酶解法、碱溶液提取法等，但这些常用的方法所制备的多糖中往往还含有大量的蛋白质，会影响多糖的功能活性及结构分析，因此还需要对多糖中的蛋白质进行去除，从而造成制备方法存在复杂、繁琐且耗时长等问题。此外，研究表明，大多数海洋生物特别是双壳软体动物对重金属具有较高的累积能力，特别是其肝脏和肾中重金属浓度较高。鲍鱼脏器多糖是从鲍鱼的内脏器官中提取的，无疑会残留一些重金属，长期或者大量被人体摄入，将严重危害人体生命健康。而对现有的多糖制备过程中无重金属去除步骤或流程。

发明内容

本发明的目的在于提供一种除蛋白去重金属的鲍鱼脏器多糖粉的制备方法，其可有效去除多糖中的蛋白质及重金属砷、铅、镉、镍，解决了现有多糖制备过程中存在的重金属、蛋白质含量高等问题，其制得的多糖粉纯度高，技术成本低，操作简单，易于推广应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种除蛋白质去重金属的鲍鱼脏器多糖粉的制备方法，包括鲍鱼脏器多糖粗溶液的制备、酶解、低温处理、板框过滤、乙醇处理、树脂吸附、真空冷冻干燥的步骤；其具体包括如下步骤：

（1）鲍鱼脏器多糖粗溶液的制备：将冷冻保存的鲍鱼脏器自然解冻后，按重量比1:1~3与水混合打浆，分离去除鲍鱼脏器中的结缔组织，得到鲍鱼脏器液；然后将所得鲍鱼脏器液进行机械分离，去除水不溶性物质，得到鲍鱼脏器多糖粗溶液；

（2）酶解：用碱性溶液调整步骤（1）所得鲍鱼脏器多糖粗溶液的pH值至5~8，加入鲍鱼脏器多糖粗溶液重量3%~7%的蛋白酶，均质2~3次后，45~55℃恒温水浴加热2~3h，得到酶解液；

（3）低温处理：将步骤（2）所得酶解液于0~4℃条件下静置5~10h，经固液分离保留上清液；

（4）板框过滤：将步骤（3）得到的上清液与混合硅藻土按重量比20:1~100:1均匀混合后，升温至30~50℃，经板框过滤处理3~4次后，得到澄清液；

（5）乙醇处理：将步骤（4）得到的澄清液与75~95wt%乙醇溶液按体积比1:3~1:4混合，于0~4℃条件下静置12~15h后进行固液分离，以去除多糖中的蛋白质，得到多糖沉淀物；

（6）树脂吸附：将步骤（5）得到的多糖沉淀物按重量比1:5~1:6加去离子水溶解，得到多糖溶解液，然后将多糖溶解液与混合离子交换树脂按体积比1:3~1:6混合，加热至30~60℃，并于50~100r/min条件下搅拌处理20~30min后过滤，再将滤液与D751螯合树脂按体积比1:3~1:6混合，加热至30~70℃，并于50~100r/min条件下搅拌处理10~20min，过滤，得到多糖溶液；

（7）真空冷冻干燥：将步骤（6）得到的多糖溶液在-10~-18℃下预冷1~3h，至多糖溶液充分冻结，然后于-30~-60℃速冻1~2h，随后转移至真空干燥仓内，于60~70Pa、40~50℃加热5~6h，再升温至70~80℃，维持4~5h，得到所述鲍鱼脏器多糖粉。

步骤（2）所述碱性溶液包括氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液；所述蛋白酶包括木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶。

步骤（4）所述混合硅藻土是由800目硅藻土与300目硅藻土按重量比为2:1~3:1混合而成。

步骤（6）中所述混合树脂是由732型阳离子交换树脂与717型阴离子交换树脂按体积比1:1~1:3混合而成。

本发明所述方法制得的鲍鱼脏器多糖粉中蛋白质含量≤10%，水分含量≤5%，重金属砷含量≤0.41mg/kg、镉含量≤ 0.18mg/kg、铅含量≤0.37mg/kg、镍含量≤0.40mg/kg。