[发明专利]山菅兰的活性提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种山菅兰的活性提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

浸提步骤：将山菅兰粉末浸泡于pH值为8-10的弱碱水中进行浸提，同时对所述弱碱水进行超声振荡，所述超声振荡的频率为20MHz-50MHZ，所述超声振荡的时间为30min-50min，然后去除所述山菅兰粉末得到浸提液，再调节所述浸提液的pH值为2-6，然后静置处理，再去除所述浸提液的上清液得到沉淀物，将所述沉淀物干燥后得到山菅兰粗提物；

萃取步骤：将所述山菅兰粗提物用水溶解得到山菅兰溶解液，然后向所述山菅兰溶解液中加入萃取剂进行萃取，所述萃取剂的体积是所述山菅兰溶解液的体积的0.5-2倍，所述萃取剂包括石油醚、氯仿和乙酸乙酯，在萃取过程中先依次用石油醚和氯仿进行萃取去除所述山菅兰溶解液中的杂质，再用乙酸乙酯进行萃取，得到乙酸乙酯萃取物；

分离步骤：用硅胶柱色谱法对所述乙酸乙酯萃取物进行分离，用不同配比的有机溶剂混合液作为洗脱剂进行梯度洗脱，得到洗脱液，然后再去除所述洗脱液中的所述洗脱剂，得到所述山菅兰的活性提取物。

2.根据权利要求1所述的山菅兰的活性提取物的制备方法，其特征在于，在所述硅胶柱色谱法中，采用干法上样，色谱柱中装有的硅胶与所述萃取物的干重之间的重量比为40～50：1。

3.根据权利要求1所述的山菅兰的活性提取物的制备方法，其特征在于，在所述硅胶柱色谱法中，所述洗脱剂包括：氯仿-丙酮混合液、乙酸乙酯-丙酮混合液、丙酮-甲醇混合液以及甲醇-水混合液，其中所述氯仿-丙酮混合液中氯仿和丙酮的体积比为10～30：1，所述乙酸乙酯-丙酮混合液中乙酸乙酯和丙酮的体积比为20～40：1，所述丙酮-甲醇混合液中丙酮和甲醇的体积比为2～10：1，所述甲醇-水混合液中甲醇和水的体积比为10～20：1。

4.根据权利要求1所述的山菅兰的活性提取物的制备方法，其特征在于，所述浸提步骤中，所述弱碱水与所述山菅兰粉末的体积比为6～10：1。

5.一种根据权利要求1-4任一项所述的制备方法制得的山菅兰的活性提取物。

6.一种根据权利要求5所述的山菅兰的活性提取物的应用，其特征在于，将所述山菅兰的活性提取物作为活性成分用于制备抑制B16黑色素瘤细胞分泌黑色素的抑制剂。