[发明专利]一种附红细胞体重组表位抗原及其免疫检测试剂盒

权利要求书

1.一种附红细胞体重组表位抗原rHspA1，其特征在于，序列如SEQ ID No.1所示。

2.一种根据权利要求1所述的附红细胞体重组表位抗原的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

从猪附红细胞体HspA1蛋白氨基酸序列中筛选B细胞抗原表位富集区，记为HspA1表位区；

根据HspA1表位区的氨基酸序列从猪附红细胞体HspA1蛋白编码基因中筛选其编码序列，记为a1-epi；

扩增a1-epi序列，并将回收产物与pMD18-T载体连接，得重组质粒pMD18-T-a1-epi；

对所述重组质粒pMD18-T-a1-epi质粒和pColdⅠ质粒分别用限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ进行双酶切鉴定、胶回收，将a1-epi的胶回收产物与酶切pColdⅠ的胶回收产物进行连接，得重组质粒pColdⅠ-a1-epi；

用所述重组质粒pColdⅠ-a1-epi转化大肠杆菌BL21菌株，得pColdI-a1-epi-E.coliBL21菌株；

将pColdI-a1-epi-E.coli BL21菌株接种于LB液体培养基，于IPTG条件下诱导培养，收集菌体并裂解，收集上清，即得附红细胞体重组表位抗原rHspA1；

所述HspA1表位区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；所述a1-epi的核苷酸序列如SEQID No.2所示。

3.根据权利要求2所述的附红细胞体重组表位抗原的制备方法，其特征在于，所述扩增用引物如SEQ ID No.3、SEQ ID No.4所示。

4.根据权利要求2所述的附红细胞体重组表位抗原的制备方法，其特征在于，所述B细胞抗原表位富集区的筛选是基于猪附红细胞体HspA1蛋白氨基酸序列生物信息学分析基础上进行的。

5.根据权利要求2所述的附红细胞体重组表位抗原的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括对所得附红细胞体重组表位抗原进行纯化的步骤。

6.一种附红细胞体免疫检测试剂盒，其特征在于，具体是以附红细胞体重组表位抗原rHspA1为包被原；所述附红细胞体重组表位抗原rHspA1是通过权利要求2～5任一制备方法获得的。

7.根据权利要求6所述的附红细胞体免疫检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的抗原包被浓度为0.5～4μg/mL。