[发明专利]一种右旋糖酐酶生产菌及其发酵制备右旋糖酐酶的方法

权利要求书

1.一种右旋糖酐酶生产菌，其特征在于，所述右旋糖酐酶生产菌为GL35-3，菌种保藏编号为CGMCCNo.11945；保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏日期为2015年12月28日；保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述右旋糖酐酶生产菌在制备右旋糖酐酶方面的应用。

3.如权利要求1所述右旋糖酐酶生产菌在制备含有右旋糖酐酶的制剂方面的应用。

4.如权利要求1所述右旋糖酐酶生产菌制备右旋糖酐酶的具体方法，步骤如下：

(1)一代斜面的制备

将菌株接种到一代斜面培养基上进行一代斜面培养，在28℃，湿度为40-60％的条件下培养6-7天；

(2)二代斜面的制备

将一代斜面培养基上活化的菌株接种到二代斜面培养基上进行二代斜面培养，在28℃，湿度为40-60％的条件下培养6-7天；

(3)种子培养

将二代斜面培养的菌株制作菌悬液，按1.5-2％(体积比)的量接种入种子培养基中，开启搅拌转速80转/min、在27-29℃条件下培养30-40h；

(4)发酵培养

将种子液按1.5-2％(体积比)的量接种入发酵培养基中，在27-29℃，转速为80转/min的条件下培养85-100h；

培养基

一代斜面培养基：蔗糖1.5g、马铃薯20g、琼脂2g，加水定容至100mL；

二代斜面培养基：蔗糖1.5g、马铃薯20g、琼脂2g，加水定容至100mL；

种子培养基：酵母浸粉5-10g/L,磷酸氢二钾2-4g/L，硫酸镁0.2-0.5g/L,氯化钾0.1-0.3g/L，右旋糖酐大分子100010-15g/L，硫酸亚铁0.005-0.01g/L，甜菜碱消沫剂0.001-0.005g/L，磷酸氢二钠0.005-0.01g/L，其余为自来水；

发酵培养基：酵母浸粉10-15g/L,磷酸氢二钾2-4g/L，硫酸镁0.2-0.5g/L,氯化钾0.1-0.3g/L，右旋糖酐大分子100010-15g/L，硫酸亚铁0.005-0.01g/L，甜菜碱消沫剂0.01-0.05g/L，磷酸氢二钠0.005-0.01g/L，其余为自来水。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)中按2％的体积比接入二代斜面培养后悬浮液，开启搅拌转速80转/min、27℃-29℃条件进行下，培养至38h。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(4)中按2％(体积比)接入种子液400L，开启搅拌转速80转/min、27℃-29℃条件进行下，培养至87h。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述种子培养基的组成如下：

酵母浸粉8g/L,磷酸氢二钾4g/L，硫酸镁0.3g/L,氯化钾0.15g/L，右旋糖酐大分子100012g/L，硫酸亚铁0.005g/L，甜菜碱消沫剂0.004g/L，磷酸氢二钠0.005g/L，其余为自来水。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成如下：

酵母浸粉11g/L,磷酸氢二钾2.5g/L，硫酸镁0.2g/L,氯化钾0.25g/L，右旋糖酐大分子1000145g/L，硫酸亚铁0.005g/L，甜菜碱消沫剂0.02g/L，磷酸氢二钠0.005g/L，其余为自来水。