[发明专利]一种制备卡贝缩宫素的方法

说明书

本发明涉及一种固液相结合合成多肽的方法，尤其是卡贝缩宫素的制备方法。主要解决现有制备方法存在的收率低、纯化成本高的技术问题。本发明技术方案：一种制备卡贝缩宫素的方法，包括以下步骤：1）由氨基树脂通过偶联剂依次与Fmoc‑Gly‑OH、Fmoc‑Leu‑OH、Fmoc‑Pro‑OH、Fmoc‑Cys(Alloc)‑OH、Fmoc‑Asn(Trt)‑OH、Fmoc‑Gln(Trt)‑OH、Fmoc‑Ile‑OH偶联得到树脂多肽；2）脱半胱氨酸保护；3）碱性条件下与4‑卤基丁酸反应，与H‑Tyr(OMe)‑OtBu偶联；4）切割多肽，液相关环；5）粗肽经高效逆流色谱纯化，冻干得到卡贝缩宫素。本发明主要用于卡贝缩宫素的制备。

技术领域

本发明涉及一种固液相结合合成多肽的方法，尤其是卡贝缩宫素的制备方法。

背景技术

预防宫缩乏力产后出血除了按摩子宫外,主要使用收缩子宫的药物。宫缩剂常用缩宫素、麦角新碱、前列腺素制剂,各种药物均有其优点及缺点。缩宫素使用最广泛,优点是起效快,安全、副反应小,缺点是作用时间短,半衰期为1~6 min,其作用的发挥依赖于体内的缩宫素受体,当受体饱和后,无限制加大用量反而效果不佳,并出现副反应,24 h总量应控制在60 u内 。因为以上原因,催产素有时作用有限。麦角新碱对子宫体、子宫下段及子宫颈均有收缩作用,可引起全子宫强直性收缩,但收缩子宫的同时可使血管平滑肌收缩,可引起血压升高,禁用于心血管疾病,国内目前断货。常用前列腺素制剂有米索前列醇和卡前列素氨丁三醇:米索前列醇系前列腺素E1的衍生物,可引起全子宫有力收缩,但副反应较大,恶心、呕吐、腹泻、寒战和体温升高较常见;青光眼、哮喘及过敏体质者禁用。卡前列素氨丁三醇(商品名:欣母沛):为前列腺素F2ct衍生物(15-甲基FGF2a),也可引起全子宫协调有力的收缩,作用效果较明显,单剂量注射后作用持续15~30 min。副反应较米索前醇轻,但价格较昂贵,目前约600元1支,价格限制了它的广泛应有,目前主要用于难治性产后出血。

卡贝缩宫素是一种合成的具有激动剂性质的长效催产素九肽类似物,它的临床和药理特性与天然产生的催产素类似,引起子宫的节律性收缩,在原有的收缩基础上,增加其频率和增加子宫张力。卡贝缩宫素对非妊娠的子宫没有作用,仅对妊娠子宫和刚生产的子宫具有有效的子宫收缩作用。静脉推注后子宫迅速收缩,可在2 min内达到一个明确强度,半衰期为40 min,明显长于缩宫素。本研究显示,卡贝缩宫素组产后2 h出血量和产后24 h出血量明显少于缩宫素组,产后出血率低于缩宫素组,与国内其他研究相符。卡贝缩宫素疗效高于缩宫素的最主要原因是其作用时间长,产后2 h是产妇最容易出血的时间,缩宫素由于其半衰期短,作用时间也短,而单剂量静脉注射100 μg卡贝缩宫素对子宫的活性作用可持续1 h以上,明显长于普通缩宫素,故作用效果更好。由于其作用时间长,除少数对缩宫素不敏感者,很少需要再加用其他药物,有研究表明,在剖官产分娩后降低产后出血发生率方面,单次静脉给药100 μg至少与连续16 h静脉滴注催产素的效果相当。

在副作用方面,使用卡贝缩宫素少数可见恶心、呕吐、腹痛、瘙痒、面红、低血压、头痛、口腔金属味,但程度很轻,无需处理。本研究每个病例仅使用1支,未见严重副反应病例,重复使用有待进一步研究。目前卡贝缩宫素市场价格约320元,较欣母沛低,患者容易接受。综上所述,卡贝缩宫素具有高效、安全、实用的优点,值得临床推广。

卡贝缩宫素分子结构

在以往的公布的卡贝缩宫素的制备技术中，有液相发和固相法制备方式，液相制备方式步骤多，要求合成人员经验丰富，每步骤纯化能力强，同时耗时耗力，不利于多肽的大规模生产。