[发明专利]一种磷酸盐缓冲液及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于细胞培养试剂技术领域，具体涉及一种磷酸盐缓冲液及其制备方法。

背景技术

磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline，简称PBS）的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS 可以为三种溶液的英文缩写，分别是磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）、磷酸盐缓冲盐水（phosphate buffered saline）及 磷酸盐缓冲钠（phosphate buffered sodium），其配制方法不同，pH 值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的 PBS 是中性磷酸盐缓冲溶液（phosphate buffered solution）。它是一种水基盐溶液中含有氯化钠，磷酸盐，以及（在某些配方）氯化钾和磷酸钾。缓冲液有助于保持恒定的pH值。解决方案的渗透压和离子浓度通常与人体pH相近（等渗）。主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节 pH 值，以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。

申请公布号 CN 103645087 A的中国专利申请“磷酸盐缓冲液”，公开了磷酸盐缓冲液的配置方法。具体步骤为：准备原料：将氯化钠1-3份、蒸馏水2-10份、四水和磷酸钠3-10份；将上述成分混合后，加入稀硫酸，将其pH值调整至7.2；高压灭菌后，低温下保存；将溶液中加入四氧化三铁溶液，然后机械高速搅拌；弃上清；形成乳状物，再次冷置；室温下保存即可。所述稀硫酸的质量分数不高于百分之三十；加入稀硫酸之前需要高速搅拌，使其完全浑浊。本发明的有益效果是，操作简单，反应条件吻合，没有使用有毒的有机溶剂，影响因素较小，可以得到很好的控释效果。

但是，上述专利制得的磷酸盐缓冲液放在室温几天后便不能使用，降低其使用寿命。

发明内容

为克服现有技术所存在的缺陷，本发明提供一种磷酸盐缓冲液及其制备方法，能够解决上述技术问题。

本发明要解决其技术问题所采用的技术方案是：设计一种磷酸盐缓冲液，磷酸盐缓冲液的主要原料包括磷酸、硫酸钠、五氧化二磷、氢氧化钠、氯化钠、鱼精蛋白、二甲亚砜、水。

作为本发明的进一步优化方案，各原料的消耗量（质量份数）为：

磷酸 60-70份

硫酸钠 20-25份

五氧化二磷 30-40份

氢氧化钠 15-20份

氯化钠 10-20份

鱼精蛋白 5-10份

二甲亚砜 5-10份

水 100-120份。

作为本发明的进一步优化方案，各原料的消耗量（质量份数）为：

磷酸 65份

硫酸钠 23份

五氧化二磷 35份

氢氧化钠 17份

氯化钠 15份

鱼精蛋白 7份

二甲亚砜 7份

水 110份。

一种磷酸盐缓冲液的制备方法，按照下述步骤依次进行：

步骤一：将上述质量份数的磷酸、硫酸钠、五氧化二磷和水在一定温度下进行搅拌、过滤制得磷酸盐；

步骤二：向上述磷酸盐中依次加入磷酸、氢氧化钠、氯化钠、鱼精蛋白、二甲亚砜和水，并进行搅拌，调节pH值达到一定值，即可获得产品。

作为本发明的进一步优化方案，步骤一中所述的一定温度为90-95℃；步骤二中所述的pH值为7.0-7.2。

本发明所具有的有益效果是：

1、本发明磷酸盐缓冲液的主要原料包括磷酸、硫酸钠、五氧化二磷、氢氧化钠、氯化钠、鱼精蛋白、二甲亚砜、水。通过鱼精蛋白能够保证缓冲液即使放在室温也能正常使用，抑制缓冲液产生菌种，延长缓冲液的活性。并且鱼精蛋白具有无臭、无味、热稳定性好、安全无毒的特点，即使在中性和偏碱性的条件下，鱼精蛋白的防腐效果更好。通过二甲亚砜提高其渗透性能。能够同时能够降低氢氧化钠的用量，保证pH值的稳定。

具体实施方式

实施例一

一种磷酸盐缓冲液的制备方法，按照下述步骤依次进行：

步骤一：将质量份数分别为50份、20份、30份和60份的磷酸、硫酸钠、五氧化二磷和水在90℃下进行搅拌、过滤制得磷酸盐；

步骤二：向上述磷酸盐中依次加入质量份数为10份、15份、10份、5份、5份和40份的磷酸、氢氧化钠、氯化钠、鱼精蛋白、二甲亚砜和水，并进行搅拌，调节pH值达到7.0，即可获得产品。