[发明专利]一种人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病动物模型制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及传染病防治技术领域，进一步涉及人类传染病动物模型的建立方法，具体涉及一种人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病动物模型制备方法。

背景技术

鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)属于沙门氏菌B群，是一群非适应性或泛嗜性的沙门氏菌，具有广泛的宿主。鼠伤寒沙门氏菌能引起各种家禽和哺乳动物的传染病，也可引起人类感染，其临床表现可分为四型，即胃肠炎型、败血症型、病灶感染型和无症状带菌型。其中胃肠炎型最常见，约占80％。潜伏期8～24小时，发病较急，主要症状为发热、腹泻、厌食、呕吐、腹痛、腹胀等，大便次数增多，严重者每日可达数十次，大便性状多样易变，为黄绿色或深绿色水样、粘液样或脓血便。新生儿可间歇排出白色胶冻样便，重症腹泻患儿可迅速出现脱水、电解质紊乱和酸中毒，甚至发生休克。大便显微镜检查可见多数白细胞和红细胞。绝大多数病人大便可培养出鼠伤寒沙门氏菌，为确诊鼠伤寒的主要依据。

由于该疾病症状复杂，而且与其他传染性肠道疾病存在相似的临床表现，因此诊断较为困难；而且由于患病人群多为小儿，因此治疗手段受到一定的限制，再加之不同患者间症状差异较大，因此相关治疗方法普适性较低，疗效难以保证。在这种情况下，为获得更好的治疗手段，现有技术的研究者尝试建立动物模型作为研究对象。在此环节中，首先，所建立的动物模型应当与人类该疾病的病理特征尽可能相似；此外，造模方法应当具有良好的可重复性；同时，动物模型作为该疾病研究对象的性能指标应当明确，并具有确切的评价方法。然而现有技术的造模方法普遍存在缺陷：在动物与病原微生物的接触过程中难以保证得到胃肠炎分型，同时又缺乏明确的筛选手段，因此所得的病患动物很可能不具有人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病的病理特征、无法作为该疾病的研究对象。

发明内容

本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病动物模型制备方法，以解决现有技术的造模方法难以保证获得可用动物模型的技术问题。

本发明要解决的另一技术问题是现有技术的人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病动物模型造模方法可重复性较低。

为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

一种人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病动物模型制备方法，包括以下步骤：

1)取体重13～16g、3～5周龄的小鼠，以浓度为0.5～1.5×10⁹cfu/mL的鼠伤寒沙门氏菌菌液灌胃处理，每次灌胃280～320uL菌液，每天灌胃2次，持续3天；每次灌胃前小鼠禁食不禁水2小时；

2)步骤1)结束后，在所述小鼠中选取：较步骤1)开始前体重下降10％以上、且较步骤1)开始前血清中IL-6含量升高50％以上、且较步骤1)开始前血清中IL-10含量升高100％以上的个体，即为所述人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病动物模型。

作为优选，所述小鼠的品种是昆明小鼠。

作为优选，步骤2)中所述个体还满足以下条件：其小肠组织中IL-6含量较步骤1)开始前升高200％以上、且其小肠组织中MPO含量较步骤1)开始前下降30％以上。

作为优选，步骤2)中所述个体还满足以下条件：其血清中白细胞含量较步骤1)开始前升高100％以上、且其血清中中性粒细胞含量较步骤1)开始前升高100％以上、且其血清中淋巴细胞含量较步骤1)开始前升高50％以上、且其血清中单核细胞含量较步骤1)开始前升高50％以上。

作为优选，步骤2)中所述个体还可以满足以下任一条件：精神倦怠；毛色失去光泽；腹泻；体重下降；小肠充气肠壁变薄；肠管内充满黄色稀薄的内容物。

在以上技术方案中，采用病原微生物直接灌胃的方式进行造模，操作方式较为简便；在此基础上，本发明进一步针对病原微生物浓度、接触量以及接触频次进行了创新性设计，有效提升了疾病模型效果。此外，本发明发现当接触病菌前控制小鼠的进水、进食状况一方面能够促进鼠伤寒病向胃肠炎分型发展，同时有助于统一动物模型的病理反应。本发明以严谨的技术构思实现了突出的技术效果，同时成本较低、易于实现，因此具有良好的应用前景，为人患鼠伤寒沙门氏菌肠炎病的临床用药提供了可靠的研究对象。

附图说明

图1是本发明实施例1中模型组小鼠与正常组小鼠平均体重变化图；

图2是本发明实施例1中正常组小鼠小肠组织HE染色图；

图3是本发明实施例1中模型组小鼠小肠组织HE染色图。

具体实施方式