[发明专利]小麦抗条锈病基因Yr69及其连锁的SSR分子标记以及使用方法有效
| 申请号： | 201610205236.8 | 申请日： | 2016-04-05 |
| 公开（公告）号： | CN105695605B | 公开（公告）日： | 2019-10-15 |
| 发明（设计）人： | 张晓军;畅志坚;贾举庆;郭慧娟;李欣;詹海仙;乔麟轶;阎晓涛;任永康;张立生;李晓华;朱艳 | 申请（专利权）人： | 山西省农业科学院作物科学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11;C12N15/29 |
| 代理公司： | 太原科卫专利事务所(普通合伙) 14100 | 代理人： | 朱源 |
| 地址： | 030031 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 小麦 条锈病 基因 yr69 及其 连锁 ssr 分子 标记 以及 使用方法 | ||
1.一种小麦抗条锈病基因
1）、以小麦基因组DNA为PCR扩增模板，以SSR分子标记2AS33为引物，进行PCR扩增，反应体系为20 μL，所述反应体系包括：50-100 ng/μL小麦基因组DNA，10×PCR buffer，具体为：10mM Tris-HCl，pH值8.3，50mM KCl，1.5mM MgCl2；0.2mM dNTP，1U Taq酶，0.25μM引物，最后加入一滴矿物油；
2）、PCR扩增程序为：94℃预变性5min；94℃变性1min，55℃ 退火45s，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸 10min；4 ℃保存备用；
3）、电泳为8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，将5μLPCR产物和5μL上样缓冲液混合后点样，180V电压下电泳2h，硝酸银染色拍照；
4）、分析鉴定，能扩增出269bp的特异条带，则说明小麦种质中存在抗条锈病基因
2.小麦抗条锈病基因Yr69连锁的SSR分子标记在抗条锈病基因Yr69鉴定中的应用，所述SSR分子标记为引物2AS33，所述引物的核苷酸序列为：上游序列为5'-AGAAGGCACACTGCTGGAAC-3'，下游序列为5'-ACATGAGTGAGTTGTGAGTC-3'。
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