[发明专利]一种用于禽流感病毒通用型直接RT-PCR检测的引物和探针及试剂盒

权利要求书

1.一种用于禽流感病毒通用型直接荧光扩增的RT-PCR检测的引物和探针序列，其特征在于，包括：

一对禽流感病毒的检测引物，其序列如SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示；

一条禽流感病毒的检测探针，其序列如SEQIDNO:3所示；该序列的3’端结合荧光淬灭基团，5’端结合荧光报告基团；

一条内标RNA的探针，其序列如SEQIDNO:4所示；该序列的3’端结合荧光淬灭基团，5’端结合荧光报告基团。

2.根据权利要求1所述的引物和探针序列，其特征在于，所述探针SEQIDNO:3的3’端结合BHQ1荧光淬灭基团，5’端结合FAM荧光报告基团；所述探针SEQIDNO:4的3’端结合BHQ3荧光淬灭基团，5’端结合CY5荧光报告基团。

3.一种用于禽流感病毒通用型直接扩增的RT-PCR检测的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测引物、检测探针和内标探针，所述检测引物的序列如SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示，所述检测探针的序列如SEQIDNO:3所示，该序列的3’端结合荧光淬灭基团，5’端结合荧光报告基团；所述内标探针如SEQIDNO:4所示，该序列的3’端结合荧光淬灭基团，5’端结合荧光报告基团。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述探针SEQIDNO:3的3’端结合有BHQ1荧光淬灭基团，5’端结合有FAM荧光报告基团；所述探针SEQIDNO:4的3’端结合BHQ3荧光淬灭基团，5’端结合CY5荧光报告基团。

5.根据权利要求3-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括禽流感病毒通用型内标溶液；

优选地，所述内标溶液通过将禽流感病毒通用型M基因克隆至RNA假病毒表达载体pAR中并将得到的质粒pAR-AIVUN通过大肠杆菌转化的方法制备。

6.根据权利要求3-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括PCR增强剂；

优选地，所述PCR增强剂选自肉碱、甜菜碱、海藻糖和非离子去污剂NP-40中的一种或多种。

7.根据权利要求3-4任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的检测对象为咽喉拭子液、泄殖腔拭子液、组织渗出液或尿囊液。