[发明专利]一种单个抗体分子原子力显微镜成像的样品制备方法

权利要求书

1.一种单个抗体分子IgG原子力显微镜成像的样品的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)将边上偶联有小分子抗原的DNA折纸与所述小分子抗原的抗体混合、反应；所述小分子抗原包括偶联在所述DNA折纸的边上、相互之间距离为8～15纳米的2个相同的小分子；

(2)将步骤(1)反应所得的产物滴加到新解离的云母片上，吸附、上镜、添加缓冲液，即制得所述单个抗体分子IgG的原子力显微镜成像的样品。

2.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述小分子抗原在所述DNA折纸每边上的数量为2～3个；和/或，所述小分子抗原的分子量为200～1000Da；和/或，所述小分子抗原为地高辛；和/或，所述小分子抗原包括距离为10～15纳米的2个相同的小分子；和/或，所述DNA折纸为矩形或等边三角形DNA折纸；和/或，所述DNA折纸的边长为70～130纳米；和/或，所述DNA折纸由单链脚手架链DNA和订书钉单链DNA自组装形成；和/或，所述小分子抗原的抗体和所述偶联有小分子抗原的DNA折纸的摩尔比为1∶1。

3.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述单链脚手架链DNA为序列如SEQ IDNO.425所示的M13mp18；和/或，所述订书钉单链DNA的核苷酸序列为如序列表中SEQ IDNO.1～SEQ ID NO.208所示的DNA序列。

4.如权利要求3所述制备方法，其特征在于，所述订书钉单链DNA的核苷酸序列中，偶联有所述小分子的碱基为如序列表中SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.8、SEQ IDNO.37、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO.63、SEQ ID NO.93、SEQ ID NO.96、SEQ ID NO.73、SEQ IDNO.102、SEQ ID NO.130、SEQ ID NO.128、SEQ ID NO.158、SEQ ID NO.161、SEQ ID NO.138、SEQ ID NO.167、SEQ ID NO.195和SEQ ID NO.193所示序列的5’末端的碱基。

5.如权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述订书钉单链DNA的核苷酸序列为如序列表中SEQ ID NO.209～SEQ ID NO.424所示的DNA序列。

6.如权利要求5所述制备方法，其特征在于，所述订书钉单链DNA的核苷酸序列中，偶联有小分子的碱基为如序列表中SEQ ID NO.209、SEQ ID NO.340、SEQ ID NO.260、SEQ IDNO.284、SEQ ID NO.283、SEQ ID NO.307、SEQ ID NO.389、SEQ ID NO.413、SEQ ID NO.412和SEQ ID NO.388所示序列的5’末端碱基。

7.如权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述步骤(1)反应所得的产物的体积为3～5微升；和/或，所述吸附的时间为3分钟；和/或，所述缓冲液为TAE缓冲液；和/或，所述缓冲液的体积为30微升。