[发明专利]藏木香中四种倍半萜类活性成分的提取分离制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物活性成分的提取分离技术领域，尤其是涉及藏木香中四种倍半萜类活性成分的提取分离制备方法。

技术背景

藏木香(InularacemosaHook.f)为菊科(Compositae)旋覆花属(Inulae)植物。我国主要分布在四川、青海、甘肃、西藏等省，以根入药，是藏医、蒙医常用药材，具有行气镇痛、健脾消食、温中和胃、胸腔胀痛、食积不消等功效。在西藏、青海等卫生局编著的《藏药标准》中共记载290种成方制剂，其中使用藏木香的制剂有75种，约占藏药方剂的26％，是藏药材中使用率非常高的药材之一。现代药理学研究表明，藏木香中含有丰富的土木香内酯和异土木香内酯等倍半萜活性成分，具有止痉挛、健胃、抗炎、驱虫、降血糖、抗增殖、抑菌、保肝等作用，具有较好的开发利用前景。目前，藏木香提取分离纯化主要采用传统的有机溶剂萃取，传统柱色谱分离手段。工艺复杂、纯度不高，而且易残留有害物质，因此利用新型提取分离纯化技术显得尤为必要。尤其是，同时获得高纯度的igalan、异土木香内酯、土木香内酯和Dugesialactone四种倍半萜类活性成分的提取分离制备方法，未见相关报道。igalan、异土木香内酯、土木香内酯和Dugesialactone四种倍半萜类活性成分的结构式如下：

亚临界水萃取技术是在上世纪90年代中期发展起来的新型萃取技术。亚临界水，是指在一定压力下(一般在5～20MPa)，温度处于100℃以上，临界温度374℃以下的高温水，且一直保持液体状态。通常条件下，水是极性化合物，在5MPa压力下，随温度升高(50～300℃)，其介电常数由70减小至1，也就是说其性质由强极性渐变为非极性，可将溶质按极性由高到低萃取出来。由于是不使用酸、碱和催化剂的水在高热高压下的处理技术，具有无毒害，安全性强，高效环保，操作简便的优势，因此亚临界水的提取方法被称之为“绿色的处理法”。目前，尚未有亚临界水提取藏木香中活性成分的研究报道。

制备色谱是指采用色谱技术制备纯物质，即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备色谱可以获得足够量的单一化合物，以满足研究和其它用途。制备色谱具有分离速度快、重现性好、分离效能高、灵敏度高等优点，目前，己广泛用于医药、精细化工、食品等行业，在工业现代化进程中具有广阔的发展与应用前景。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简便、快捷的藏木香中四种倍半萜类活性成分的提取分离制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：

藏木香中四种倍半萜类活性成分的提取分离制备方法，包括以下步骤：

(1)将藏木香根粉碎至20～60目，得到藏木香粉末；

(2)将步骤(1)所得的藏木香粉末放入亚临界水提取装置萃取釜中，以水为提取剂连续流动提取，水的流速控制在1～20mL/min，压力控制在0.5～3.0MPa之间，温度控制在120～250℃之间，提取时间为30-90min，最终的到萃取液；(3)将步骤(2)中得到的萃取液放入离心机的离心管中，在转速2000～6000r/min下离心5～15min后，取下离心管，得到上清液；

(4)将步骤(3)中所得到的上清液于温度为55～80℃、压力为0.06～0.08MPa的条件下的旋转蒸发仪上浓缩回收，浓缩相当于原体积的5％～10％，得到浓缩液；

(5)将步骤(4)所得浓缩液用乙酸乙酯萃取3～5次，得到乙酸乙酯萃取液和残余水液二部分；乙酸乙酯萃取液在温度为50～70℃、压力为0.06～0.08MPa的条件下经减压蒸干至恒重，即得萃取物；

(6)将步骤(5)所得萃取物用甲醇溶解，甲醇与萃取物的液固比为2～10mL/g，得到藏木香倍半萜待分离样品；所得待分离样品，注入到制备型高效液相色谱仪中等度洗脱，分别得到igalan、异土木香内酯、土木香内酯和Dugesialactone洗脱液；该igalan、异土木香内酯、土木香内酯和Dugesialactone洗脱液分别在温度为50～70℃、压力为0.06～0.08MPa的条件下经减压蒸干至恒重，即分别得到淡黄色粉末的igalan、异土木香内酯、土木香内酯和Dugesialactone。

进一步，步骤(2)所述的提取溶剂水为去离子水、蒸馏水或者高纯水，使用的设备为连续流动式的亚临界提取的反应釜。