[发明专利]一株海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005及其应用

权利要求书

1.一株海洋真菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum）DLEN2008005，其特征在于，于2016年1月29日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.12105；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.根据权利要求1所述海洋真菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum）DLEN2008005，其特征在于，该菌株的ITS1-5.8S-ITS2 rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述海洋真菌哈茨木霉（Trichoderma harzianum）DLEN2008005，其特征在于，该菌株具有下述性质：接种到海水马铃薯蔗糖培养基平板上，28℃培养，菌落开始为白絮状，圆形，向四周扩展，后从菌落中央向边缘产生灰绿色孢子，菌落边缘颜色略浅，整个菌落呈松散絮状；显微镜下菌丝纤细无色，具分隔，多分枝；分生孢子梗从菌丝的侧枝上生出，对生或互生，有2～3次分枝，着生分生孢子的小梗瓶形或锥形；分生孢子多为球形，孢壁具小疣突，蓝绿色；该菌株最佳生长温度范围26～30℃，最佳生长pH为6.0～7.0，最佳生长盐浓度范围为2.0%～5.0%，可利用葡萄糖、蔗糖、乳糖；该菌株在海水马铃薯蔗糖液体培养基中静置发酵可产生抗氧化和乙酰胆碱酯酶抑制剂活性物质。

4.权利要求1所述海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005在制备抗氧化药物和/或抑制乙酰胆碱酯酶活性的药物中的应用。

5.权利要求1所述海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005的培养物，其特征在于，包含菌体和菌体发酵培养产物。

6.根据权利要求5所述海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005的培养物，其特征在于，所述培养物是通过将海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005接种于灭菌的液体培养基中，自然光照28℃培养21～24天获得；其中，所述液体培养基的制备方法为：每500mL马铃薯煮汁中加入20.0g蔗糖和20.0g海盐，自然pH值；所述马铃薯煮汁为：取新鲜马铃薯去皮切成1cm³大小块状，每200g马铃薯块加蒸馏水500 mL煮沸20 min，双层脱脂纱布过滤，并以蒸馏水定容至500mL。

7.根据权利要求6所述海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005的培养物，其特征在于，所述培养物的获得方法如下：

（1）种子培养：将菌种从斜面上接种到无菌的种子固体培养基平板上，将培养皿平板置于恒温培养箱中28℃下倒置培养，培养时间为4～5天；

（2）扩大培养：将1L液体培养基灌装到3L三角瓶中，用透气封口膜封口后于高压灭菌锅中121℃、0.1 Mpa灭菌20min；冷却后按照每1000mL液体培养基接种上述步骤（1）培养后的种子平板带菌培养基块40～80cm²的比例接种，封口，置于恒温培养箱中培养，自然光照，培养时间为21～24天，得到培养物；

其中，所用到的培养基如下：

种子固体培养基为：每500mL马铃薯煮汁中加入20.0g蔗糖、20.0g海盐和15.0g琼脂，自然pH值；

液体培养基为：每500mL马铃薯煮汁中加入20.0g蔗糖和20.0g海盐，自然pH值；

其中，马铃薯煮汁：取新鲜马铃薯去皮切成1cm³大小块状，每200g马铃薯块加蒸馏水500mL煮沸20 min，双层脱脂纱布过滤，并以蒸馏水定容至500mL。

8.权利要求5所述海洋真菌哈茨木霉DLEN2008005的培养物在制备抗氧化药物和/或抑制乙酰胆碱酯酶活性的药物中的应用。